技术讲解转铁蛋白(Transferrin)--无血清细胞培养添加物

>>>背景介绍

转铁蛋白又名运铁蛋白（Transferrin，TRF、Tf），负责运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁。以三价铁复合物（Tf-Fe3+）的形式进入骨髓中，供成熟红细胞的生成。转铁蛋白主要存在于血浆中，血浆中的转铁蛋白供应机体绝大部分组织的铁，而在其不能到达的部位，由这些组织自己合成的转铁蛋白在局部产生转铁作用。

图1: 转铁蛋白的结构

人转铁蛋白（Human Transferrin）主要在肝脏合成，是由位于同源N-端和C-端的两个叶片（Lobe）组成的一种单链糖蛋白。人转铁蛋白共含678个氨基酸残基，等电点为5.9、分子量为76kD。每分子的转铁蛋白能携带2个三价铁离子(Fe3+)。转铁蛋白与Fe3+的相互作用取决于pH，pH为7.4时，转铁蛋白与Fe3+高效结合，在酸性pH下两者分离。

>>>存在形式

>>>作用机制

转铁蛋白（Tf）结合铁是通过与其受体，即Transferrin Receptor 1(TfR1)相互作用而实现的。TfR1 是一种表达于细胞表面的糖蛋白，由两个同源二聚体的亚基通过二硫键连接而成。在细胞表面，Tf与Fe3+相互作用形成全铁-Tf，并与TfR1受体结合，在细胞内吞作用下进入核内体。在偏酸性核内体的环境中，Fe3+与Tf分离，同时STEAP3将Fe3+还原为Fe2+，并被二价金属离子转运蛋白1（DMT1）转运到细胞质中，然后释放了Fe3+的Tf与TfR1组成Tf/TfR1复合物，通过胞吐作用回游到细胞表面。在细胞表面，转帖蛋白（Tf）与受体TfR1分离，成为脱铁-Tf，然后再与Fe3+重新结合参与铁循环。整个过程完成后Tf和TfR1被循环利用，进入细胞摄取铁的下一个周期中。

图2: 转铁蛋白循环机理图

>>>转铁蛋白主要功能

>>>转铁蛋白来源

>>>产品特点

安全性好：产品通过多层质检检测，避免了病原体的污染；

毒性小：细胞毒性非常低，对后续实验没有影响；

性能稳定：每批次均从同一细胞株中表达，性能差别小，蛋白纯度高

操作简单： 只需将产品加入培基中即可；

应用性广：可适用于不同类型细胞的培养。

>>>FAQ

Q1：无血清培养基中应该添加提取的转铁蛋白，还是重组的转铁蛋白？

答：提取的转铁蛋白具有安全性差和批间差大等缺陷，尤其是将提取的转铁蛋白添加于用于细胞培养的无血清培养基中时，可能会将人或动物的病原体（如疯牛病病毒，克雅氏病毒和其它未知病原体）带入细胞中，污染细胞。重组的转铁蛋白完全避免了病原体污染的可能性，因此无血清培养基中更应该添加重组的转铁蛋白。

Q2：培养基中应该添加铁饱和(Holo)转铁蛋白，还是脱铁(Apo)转铁蛋白?

答：当培养基中不含铁或铁含量较低时，选择添加铁饱和(Holo)的转铁蛋白；当培养基中富含铁时，选择脱铁转铁蛋白。

Q3：铁饱和(Holo)的转铁蛋白和脱铁(Apo)的转铁蛋白，哪个效果好?

答：无法从理论上推断出两者的效果好坏，需要通过实验检测。

Q4：转铁蛋白在无血清培养基中的浓度是多少?

答：转铁蛋白的浓度和细胞类型有关，具体的浓度与细胞状态、细胞浓度、实验目的有关。一般原代细胞：5-100mg/L；中国仓鼠卵巢细胞：10-50mg/L；杂交瘤和Vero细胞：5-20mg/L

>>>订购信息

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