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技术讲解Strep标签纯化介质，你选对了吗？

📂 蛋白纯化类型 ID 5006

👁 13,719 次浏览 🗓 2026-10-12 源站内容 ID：3127

研究者们利用总结合力(Avidity)的原理，将两个Strep-tag Ⅱ以linker连接在一起，称作: Twin-Strep-tag。这一新标签的出现再度提升了目标蛋白与Streptactin的链接强度，改善了低浓度样本纯化效果，还能于捕捉蛋白复合体、检测蛋白间的相互作用。

来源：翌圣生物｜原文：https://www.yeasen.com/solutiondetail/3127 ↗

Strep标签发展史

生物素化蛋白

生物素化 (Biotinylation) 是将生物素以共价键连接到分子（如氨基酸或蛋白质）上的过程。由于生物素很小，生物素化通常快速且具有特异性，不易干扰分子固有功能。

生物素与链霉亲和素(Streptavidin)具有极高的亲和力、快速性和高特异性，因此，生物素化被广泛应用于生物医学领域，生物素化蛋白作为一种分子工具广泛用于生物技术。

Strep-tag蛋白

Strep标签 (Trp-Arg-His-Pro-Gln-Phe-Gly-Gly)是能与链霉亲和素特异性结合的一种亲和标签。与生物素相比，Strep标签和链霉亲和素间的亲和力较低，因此可以使用生物素衍生物(Diaminobiotin)，进行在生理条件下的温和洗脱。但Strep标签仅能接在目标蛋白的C端，对于需将标签接在N端或是蛋白内部的实验，非常的不实用。

Strep-tag Ⅱ蛋白

经过进一步的优化后，得到了现在被广泛使用的Strep-tag Ⅱ(Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys)。Streptactin作为优化后的链霉亲和素，Streptactin:Strep-tag Ⅱ的亲和力较Streptavidin：Strep-tag Ⅱ提升了近100倍，这个改变使得洗脱时需改用脱硫生物素(Desthiobiotin) ，但过程一样温合。Strep-tag Ⅱ逐渐被广泛应用于纯化或检测蛋白质中，还甚至发展出细胞分离检测的方法。

Twin-Strep-tag蛋白

产品简介

填料名称	Streptavidin Agarose Resin 6FF	Streptactin Agarose Resin 6FF
基质	高度交联的6%琼脂糖微球
粒径	45-165 μm
配体	Streptavidin	Streptactin
载量/mL介质	>200 nmol Biotin	3-5 mg Twin Strep-tag II蛋白
产品应用	1、生物素或生物素化物质的纯化；如固定生物素化抗体纯化抗原，或固定生物素化蛋白纯化抗体； 2、亚氨基生物素标签物质的纯化。	1、可用于Strep-Tag II标签蛋白纯化； 2、可用于Twin Strep-Tag II标签纯化。
优劣势	1、链霉亲和素相对于亲和素的优点是，显著降低非特异性吸附；其对生物素的结合能力与亲和素相当； 2、链酶亲和素与生物素结合非常牢固，只有将这些物质变性后才能从填料上洗脱下来。而链霉亲和素对亚氨基生物素的亲和力相对较弱,可以在非变性的条件下洗脱。	1、纯化过程温和、目的蛋白纯度高、特异性強、兼容多种表达系统，对于有挑战性蛋白的纯化十分有帮助； 2、对洗脱试剂有一定的要求，D-脱硫生物素与Streptactin结合后能用HABA竞争取代，再生前后载量变化较小；而D-生物素与Streptactin结合紧密，无法用HABA完全竞争取代，高浓度氢氧化钠洗脱后载量只能达到初始载量的50%左右。

表1.Streptavidin and Streptactin Agarose Resin 6FF对比

产品测试

图1.Streptactin Agarose Resin 4FF纯化strep tag Ⅱ跑胶图

1:marker；2:样品；3:流出液；4:洗脱液

纯度>98%

产品信息

产品名称	产品编号	规格
Streptactin Agarose Resin 4FF（Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂）	20495ES08	5 mL
	20495ES25	25 mL
	20495ES60	100 mL
Streptavidin Agarose Resin 6FF 链霉亲和素琼脂糖纯化树脂	20512ES08	5 mL
	20512ES25	5 mL×5
	20512ES60	100 mL
BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 1ML 生物素分子纯化预装柱，1ML	20513ES03	1 mL
	20513ES08	1 mL×5
BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 5ML 生物素分子纯化预装柱，5ML	20514ES08	5 mL
	20514ES25	5 mL×5
Streptavidin (SAV) MagBeads 链霉亲和素（SAV）免疫磁珠	47503ES03	1 mL

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来源与原文

来源： 翌圣生物

原文链接： https://www.yeasen.com/solutiondetail/3127

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