技术讲解“全能”快速PCR Mix，菌液酵母统统拿捏

PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应，是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点，体系中加入dNTP、Mg²⁺以及延伸因子、扩增增强因子，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程，能快速特异地在体外扩增任何目的DNA。

图1. 聚合酶链式反应

一般来说，每一次PCR反应都要经过变性、退火以及延伸，各阶段所需时间各不相同，而延伸时间的长短直接决定了PCR的扩增速率。翌圣匠人通过不断创新，一代又一代的产品更迭，终于研发出了一款集快速、应用范围广于一体的全能快速PCR Mix（Cat#10157）。

图2. 以人源基因组为模板，分别扩增长度为1, 2, 3, 4, 8 kb的目的片段。PCR反应条件使用本公司推荐的PCR反应条件。反应结束后，取4μl进行电泳=检测。Marker:15000bp DNA 。

图3. 10157ES03置于37℃分别进行0d，7d，14d的产品稳定性测试，模板GC含量为30-70%。结果可以看出37℃放置14天产品性能依然稳定，且GC兼容性很强。M: 15000 DNA Marker

图4. 以8 kb人gDNA为模板进行基因组DNA扩增灵敏度测试。

图5. 以简单裂解的酵母水溶液为模板进行扩增测试。条件：水煮5min后，取20μL酵母水溶液加入50μL体系中。

客户反馈

图6. 模板未经纯化，目的片段GC含量58.8%大小1034bp，样本来源为鼠尾（来自北京大学深圳研究生院）。

FAQ

Q：PCR Mix扩增产物类型？

A：3'-A产物。可用于TA克隆。

Q: PCR Mix有没有3'-5的外切酶活性？

A：没有。

Q：PCR Mix校正因子矫正的是Taq酶吗？是什么成分？延长因子是什么？

A：校正因子校正的是错配碱基，它是一类具有校正活性的酶，延伸因子是帮助合成长片段的，是一个辅助蛋白。

Q：PCR Mix是否含SDS和溴酚蓝？

A：不含SDS,含溴酚蓝。

Q: 10157镁离子浓度，dNTP中浓度分别是多少？

A：镁离子终浓度1.5mM,dNTP 0.3mM。

Q：PCR mix 保质期多久？

A：-20℃，有效期2年。

Q: PCR mix稳定性测试结果？

A：反复冻融100次，37C放置14天，依然稳定。

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