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文献解读Nature|翌圣克隆试剂盒助力揭示核仁超微精细结构与功能

📂 克隆系列类型 ID 5004

👁 19,958 次浏览 🗓 2026-10-13 源站内容 ID：3317

分子克隆技术发展至今，从最经典的酶切酶连法到简便、快速的同源重组法，广受科研小伙伴的青睐！翌圣一步法快速克隆试剂盒（Cat#10911、10922）自上市以来，受到了众多小伙伴的支持！好评如潮！

来源：翌圣生物｜原文：https://www.yeasen.com/solutiondetail/3317 ↗

小翌了解到使用翌圣一步法快速克隆试剂盒的最高分文章发表在Nature（IF 69.504）期刊，其余多篇发表在Nucleic acids research (IF 19.16)、Nature cell biology(IF 28.824)、Cell Metabolism(IF 31.373)。

高分文章分享

Nucleolar URB1 ensures 3′ ETS rRNA removal to prevent exosome surveillance

研究团队：中国科学院陈玲玲研究组

发表期刊：Nature

影响因子：69.504

发表日期：2023年3月8日

研究背景：核仁通常表现为单一或多个匀质的球形小体，是真核细胞间期核中最显著的结构。核仁的主要功能是进行核糖体与RNA(rRNA)的合成。它包含数百种蛋白质，大多数核仁蛋白质的精确定位及其如何参与pre-rRNA加工等问题尚不清楚。

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URB1调控pre-rRNA 3’末端的折叠和加工（图片来自原文）

研究人员利用CRISPR/Cas9技术构建双色荧光标记的细胞系，利用高分辨率活细胞显微镜，通过筛选200个候选核仁蛋白，发现了12种蛋白向致密纤维组分外围富集。通过敲除URB1的斑马鱼等动物模型，发现12种蛋白中的关键蛋白URB1对维持该区域的完整性、锚定pre-rRNA 3’端及正确折叠加工起到至关重要的作用。该工作全面展示了核仁精细结构，关键蛋白与pre-rRNA的协同加工来维持核仁稳定，为深入研究核仁蛋白质提供了新的思路。

涉及克隆产品

（截图来自原文）

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翌圣生物一步法快速克隆试剂盒是一种利用同源重组的原理，进行无缝克隆的技术。该技术无需考虑酶切位点，将PCR产物定向克隆至任何载体的任何位点，可高效克隆50 bp-10 kb片段。操作过程简单快速，只需50°C，20 min即可完成反应。劲爆的是，多个片段也可以同时克隆哦！

反馈1：中国科学院病毒所

单片段连接：5033bp+1863bp

图1. 使用10922ES和竞品N*进行单片段连接，阳性率100%。

A：竞品N*转化平板。B：竞品N*重组转化平板。C：10922ES转化平板。D：10922ES转化平板

反馈2：中国农业科学院油料作物研究所

4片段连接：2853bp+2487bp+227bp+2137bp+331bp

图2. 使用10922ES进行4片段连接

A：10922ES转化平板图。B：线性化载体与插入片段电泳图，M1为Yeasen DL5000；泳道1为片段A（2487 bp）；泳道2、3为片段C（2137 bp）；泳道4为线性化载体（2853 bp）；泳道5为片段B（227 bp）；泳道8为片段D（331bp）。C：阳性克隆检测电泳图，M2为ATG10kb，PCR检测大小为1883bp。

反馈3：安徽农业大学

单片段连接：8130bp+760bp

图3. 使用10922ES进行单片段连接

A：10922ES转化平板图。B：线性化载体电泳图，M1为Yeasen GoldBand 1 kb DNA ladder，泳道1、2、3为载体用EcoRI线性化。C：插入片段电泳图，M2为 DL2000 Plus DNA Marker，泳道1、2均为PCR产物。D：酶切检测重组载体，M1为1 kb Marker，泳道1、2、3、4均为酶切鉴定阳性克隆。

小翌助您克隆过关斩将，每天都出好数据。更多相关产品如下表所示，欢迎选购。

产品定位	产品名称	产品货号	规格
单片段一步克隆	Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit一步法快速克隆试剂盒	10911ES20	20T
1-5片段一步克隆	Hieff Clone® Plus Multi One Step Cloning Kit 多片段一步法快速克隆试剂盒	10912ES10	10T
1-6片段一步克隆	Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit	10922ES20	20T
替代TA连接克隆	Hieff Clone® Zero TOPO-TA Cloning Kit 零背景TOPO-TA克隆试剂盒	10907ES20	20T
替代TA连接克隆	Hieff Clone® Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted 零背景TOPO-TA克隆试剂盒（不含MCS多克隆酶切位点）	10908ES20	20T
替代平末端连接克隆	Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Cloning Kit 零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒	10909ES20	20T
替代平末端连接克隆	Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit 零背景TOPO-Blunt平末端克隆试剂盒（不含MCS多克隆酶切位点）	10910ES20	20T
感受态	TOP10 Chemically Competent Cell TOP10化学感受态细胞	11801ES80	10×100 μL
	DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化学感受态细胞	11802ES80	10×100 μL
	BL21 (DE3) Chemically Competent Cell BL21 (DE3)化学感受态细胞	11804ES80	10×100 μL
高保真酶，83×Taq	2×Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye) 高保真酶预混液	10154ES01	100 μL

来源与原文

来源： 翌圣生物

原文链接： https://www.yeasen.com/solutiondetail/3317

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