Article Detail

Techniques不止于胆固醇：低密度脂蛋白LDL在肥大细胞诱导中的关键使命

📂 细胞培养 Type ID 5006

👁 457 views 🗓 2026-10-12 Source ID：2082756815150141440

Source: Yeasen Biotech ｜ Original: https://www.yeasen.com/solutiondetail/2082756815150141440 ↗

肥大细胞（mast cell）又称组织嗜碱细胞，与嗜碱性粒细胞共同起源于骨髓造血干细胞。血液循环中存在的祖细胞在局部特定因素（如干细胞生长因子、IL-3等）的刺激下进一步发育成为成熟的肥大细胞。肥大细胞在多种疾病的发病机制中发挥关键作用，包括过敏性和自身免疫性疾病，支持这些观点的大多数事实来自动物疾病模型，特别是肥大细胞缺陷小鼠模型。相比之下，肥大细胞在人类健康和疾病中的作用研究较少，尽管目前存在可以传代的肥大细胞株，然而这些细胞株常缺乏显著的成熟肥大细胞特性和功能，与原代人肥大细胞存在显著差异，因此体外诱导培养获取大量高纯度的原代人肥大细胞对我们进一步研究其在人类健康和疾病中的作用有重要意义。

在《Journal of Immunological Methods》上发表的一篇题为《A novel method to generate and culture human mast cells: Peripheral CD34+ stem cell-derived mast cells (PSCMCs)》的文章，研究人员发现如果在含有干细胞生长因子（SCF）和IL-3的培养体系中加入低密度脂蛋白（LDL），则会促进细胞向肥大细胞进一步分化。

图1：研究人员体外诱导培养人肥大细胞方案的示意图

在以上研究中，低密度脂蛋白（LDL）在诱导造血干细胞向肥大细胞定向分化中发挥着不可替代的关键作用：

LDL是肥大细胞高效分化的必需成分

表1：研究人员分别从10⁶个CD34+细胞出发，不同因子分组得到的肥大细胞量对比

备注：IL-3 + SCF + LDL三者联合使用，从10⁶个CD34+细胞出发，每批次可稳定获得超过4×10⁷个细胞，产量远超单一或双因子组合，LDL的加入使肥大细胞产量提升10倍以上！

LDL直接促进肥大细胞成熟与功能化

成熟的肥大细胞（MCs）需要产生脂质以促进胞质颗粒的形成。在实验方案中添加低密度脂蛋白（LDL），可直接向发育中的肥大细胞递送复杂的磷脂，从而加速这一过程，进而促进其成熟。

LDL是无血清培养体系成功的关键

以LDL为脂质来源的无血清培养体系，相比胎牛血清（FCS）具有多重优势：避免血清毒性、避免IgE干扰、批次可控。

体外诱导培养人肥大细胞实验方案一键复制

准备人造血干细胞浓缩物，37℃快速解冻后，磁珠法分选CD34+细胞。

分选的CD34+细胞重悬于PSCMC培养基（SFEM无血清培养基+青霉素/链霉素（Cat#60162ES）+人LDL（50 μg/mL（Cat#20613ES））。细胞计数后，将10⁶~10⁷个细胞用7 mL PSCMC培养基稀释于小型培养瓶中。加入人重组IL-3（100 ng/mL（Cat#90104ES））和SCF（100 ng/mL（Cat#92251ES））。

第1天，对细胞进行计数，并以5×10⁵个细胞/mL的密度接种于PSCMC培养基中。在此阶段，活率低于90%（台盼蓝染色法）或总细胞数低于10⁶个分选CD34+细胞的培养物被弃去。每3至4天添加IL-3（Cat#90104ES）和SCF（Cat#92251ES），使其终浓度达到20 ng/mL。

培养第二周末，加入10 ng/mL SCF（Cat#92251ES），并将细胞置于撤除IL-3的条件下继续培养至少一周（静息期），期间不添加任何物质。取培养3周后的PSCMCs进行后续数据分析。

实验结果：

图2：在IL-3、SCF和LDL存在条件下培养的CD34+细胞逐渐获得分化肥大细胞的组织化学标志物，包括异染性胞质颗粒

图3：培养第21天，甲苯胺蓝染色鉴定，绝大多数细胞为肥大细胞

翌圣生物可为科研人员提供人源LDL、人源氧化LDL（Ox-LDL）、人源乙酰化LDL以及带荧光标记的LDL脂蛋白，均为无菌包装，直接稀释使用即可。后续也将持续推出保质期高达6个月的冻干粉脂蛋白。同时提供小鼠LDL与氧化LDL（Ox-LDL），同源匹配、活性稳定，小鼠血管/巨噬细胞实验直接“鼠”于您，告别跨物种误差。

表2：翌圣人源LDL产品选购指南

产品货号	英文名称	中文名称	规格	来源	应用建议
20605ES/ 20925ES	Human Ox-LDL/ Human Ox-LDL，Powder	人源氧化低密度脂蛋白/人源氧化低密度脂蛋白（冻干粉）	2 mg/ 5×2 mg/ 2 mg	由过度铜离子介导人血浆来源的LDL进行的氧化修饰	广泛用于脂质代谢的研究，诱导巨噬细胞产生泡沫样细胞
20613ES	Human LDL	人源低密度脂蛋白	2 mg	来自健康人源血浆，超速离心纯化获得	可用于研究受体介导的内吞作用过程
20614ES	Human DiI-LDL	红色荧光标记人源低密度脂蛋白	500 μg	荧光探针Dil标记LDL	用来观察培养细胞的LDL结合位点，或筛选LDL受体表达缺陷型细胞突变株。也可以通过流式细胞术评估细胞受体水平或检测组织内的受体水平
20608ES	Human High Ox-LDL	人源高氧化程度低密度脂蛋白	2 mg	由过度铜离子介导人血浆来源的 LDL 进行的高度氧化修饰	可产生明显的氧化应激，能够用来诱导细胞凋亡，并建立细胞损伤模型
20609ES	Human DiI-Ox-LDL	人源红色荧光标记氧化型低密度脂蛋白	500 μg	荧光探针Dil标记Ox-LDL	标记血管内皮细胞和巨噬细胞，可直接荧光显微镜观察鉴定或流式分选这些细胞，以及用来研究不同细胞系对修饰化LDL的内吞作用
20604ES	Human Ac-LDL	人源乙酰化低密度脂蛋白	2 mg/ 5×2 mg	来自健康人源血浆LDL，进行乙酰化修饰	修饰型LDL更容易与内皮细胞和小胶质神经细胞的“scavenger”受体结合
20606ES	Human DiI-Ac-LDL	红色荧光标记人源乙酰化低密度脂蛋白	500 μg	荧光探针Dil标记Ac-LDL	标记血管内皮细胞、巨噬细胞和内皮祖细胞（EPC），可直接荧光显微镜观察鉴定或流式分选这些细胞，以及用来研究不同细胞系对修饰化LDL的内吞作用

翌圣脂蛋白产品已助力胆固醇相关研究在《Nature》《Cell Metabolism》等顶级期刊发表多篇文献，获得众多科研专家的高度认可。部分已发表文章展示：

[1] Inhibition of ASGR1 decreases lipid levels by promoting cholesterol excretion. Nature. 2022 Aug; 608(7922):413-420. doi: 10.1038/s41586-022-05006-3. （IF:69.504）

[2] Identification and evaluation of a lipid-lowering small compound in preclinical models and in a Phase I trial. Cell Metab. 2022 May 3; 34(5):667-680.e6. doi: 10.1016/j.cmet.2022.03.006. （IF:27.287)

[3] Augmenting ATG14 alleviates atherosclerosis and inhibits inflammation via promotion of autophagosome-lysosome fusion in macrophages. Autophagy. 2021 Dec; 17(12):4218-4230. doi: 10.1080/15548627. 2021.1909833. Epub 2021 May 4. （IF:16.016)

[4] An atherosclerotic plaque-targeted single-chain antibody for MR/NIR-II imaging of atherosclerosis and anti-atherosclerosis therapy. J Nanobiotechnology. 2021 Sep 28;19(1):296. doi: 10.1186/s12951-021-01047-4.（IF:10.435)

[5] Efficient endothelial and smooth muscle cell differentiation from human pluripotent stem cells through a simplified insulin-free culture system. Biomaterials. 2021 Apr; 271:120713. doi: 10.1016/j. biomaterials. 2021.120713.（IF:12.479)

[6] Lysosomal integral membrane protein-2 (LIMP-2/SCARB2) is involved in lysosomal cholesterol export. Nat Commun. 2019 Aug 6;10(1):3521. doi: 10.1038/s41467-019-11425-0.（IF:11.878)

滑动查看更多文献

目前，该类产品已成功拓展至肥大细胞研究领域，肥大细胞研究领域引用文献

[1] Schmetzer, O. et al. A novel method to generate and culture human mast cells: Peripheral CD34+ stem cell-derived mast cells (PSCMCs). J. Immunol. Methods 413, 62–8 (2014).

后续将持续开发更多创新应用场景。

产品信息

产品名称	产品编号	规格
Human Ox-LDL 人源氧化低密度脂蛋白	20605ES05/10	2 mg/ 5×2 mg
Human Ox-LDL，Powder 人源氧化低密度脂蛋白（冻干粉）	20925ES05	2 mg
Human Ac-LDL 人源乙酰化低密度脂蛋白	20604ES05/10	2 mg/ 5×2 mg
Human DiI-Ac-LDL DiI标记人源乙酰化低密度脂蛋白（红色荧光）	20606ES76	500 μg
Human High Ox-LDL 人源高氧化程度低密度脂蛋白	20608ES05	2 mg
Human DiI-Ox-LDL 人源红色荧光标记氧化型低密度脂蛋白	20609ES76	500 μg
Human LDL 人源低密度脂蛋白	20613ES05	2 mg
Human DiI-LDL 红色荧光标记人源低密度脂蛋白	20614ES76	500 μg
Mouse Low Density Lipoprotein（Mouse LDL）小鼠低密度脂蛋白	20913ES05	2 mg
Mouse Oxidized Low Density Lipoprotein（Mouse Ox-LDL）小鼠氧化低密度脂蛋白	20915ES05	2 mg
Human VLDL 人极低密度脂蛋白	20617ES05	2 mg
Human HDL 人源高密度脂蛋白	20610ES05	2 mg

翌圣生物依托多年研发生产经验与技术积累，开发了一系列“三高一低”的HiActi®细胞因子，经过严格的质量控制及细胞功能的验证，确保产品具有高活性、高纯度、高稳定性、低内毒素水平，助您拿到理想的实验结果。

相关细胞因子订购

产品名称	产品编号	规格
HiActi® Recombinant Human IL-3 Protein 重组人白介素-3	90104ES10/50	10 μg/ 50 μg
HiActi® Recombinant Human SCF Protein 重组人干细胞因子	92251ES05/10	2 μg/ 10 μg
HiActi® Recombinant Mouse IL-3 Protein 重组小鼠白介素-3	90143ES05/10	2 μg/ 10 μg
HiActi® Recombinant Mouse SCF Protein 重组小鼠干细胞因子	92260ES05/10	2 μg/ 10 μg

Source

Source: Yeasen Biotech

Original URL: https://www.yeasen.com/solutiondetail/2082756815150141440

Source ID: 2082756815150141440

Content is compiled from Yeasen Biotech public materials; all rights belong to the original author.

Products CoveredFrom source article