News从“被动检测”到“主动设计”—— 翌圣HCP定制服务正式上线！

生物制品中HCP残留含量通常被认为是产品的关键质量属性(CQA)，是工艺稳健性监测的重要评价指标，也是产品的重要质控指标。各国法规都有涉及HCP的论述，要求必须对生物药品进行分析和纯化，以将宿主细胞蛋白HCP降低到可接受的水平。对HCP的接受程度将根据具体情况进行评估，并取决于多个因素，其中包括：剂量、给药频率、药物类型和疾病严重程度。

由此可见，监管机构对于HCP的要求是高度一致的，生物制品的工艺开发必须经过HCP检测，并证明纯化工艺能够将HCP降低到安全水平，并且在最终产品的残留量限值中，中美的推荐限度值均在0.01%以下。

此外，美国药典USP<1132>和欧洲药典EP2.6.34. HOST-CELL PROTEIN ASSAYS指出在产品开发的不同阶段，推荐采用不同的ELISA试剂盒用于HCP的检测，并将HCP检测方法分为：商业化试剂盒、产品/工艺专属性方法和平台化方法。

USP<1132>提到在没有平台化方法的情况下可以在临床前、临床I期、II期使用商品化试剂盒；在临床III期/工艺验证及产品上市后，由于商业化的通用HCP检测试剂盒抗体的覆盖率往往不足等局限性，需要考虑结合细胞类型及工艺特异性等因素，使用平台化方法或针对上游工艺开发的产品/工艺专属性方法。

图1.USP <1132>中产品开发的不同阶段HCP检测方法的建议

表2.不同HCP试剂盒类型的比较

鉴于HCP检测的重要性，翌圣生物建立了蛋白抗体关键原料研发平台和独立的免疫检测产品开发实验室，并配备了先进研发仪器设备，如：酶标仪和2D-WB双向凝胶电泳-免疫印迹仪等。研发平台已经非常成熟，可以快速完成哺乳动物细胞、昆虫细胞（如Sf9）、细菌和酵母等多种宿主细胞残留蛋白（HCP）试剂盒定制服务。

1、宿主细胞残留蛋白检测试剂盒定制服务，周期6~10个月。

2、抗原抗体制备：确定HCP抗原、建立HCP参考品、制定免疫路径和策略、制备HCP抗体等，周期通常4~6个月；

3、试剂盒开发：抗体优化、覆盖率分析、试剂盒方法验证等，周期通常2~4个月。

已知，ELISA法是行业内检测HCP残留的金标准，然而该方法的准确性取决于多克隆抗体对HCP的覆盖率。《美国药典》和《欧洲药典》中提到免疫亲和纯化、2D-WB是表征HCP ELISA抗体及其覆盖率的推荐方法。

2D-WB首先采用二维凝胶根据大小和电荷分离蛋白质，然后将这些蛋白质转移到膜上与 HCP 抗体一起孵育以进行蛋白质印迹检测。

翌圣生物拥有全套2D-WB仪器设备和丰富的实验室操作经验，可针对CHO、E.coli、HEK293等宿主细胞的HCP样品，提供抗体覆盖率验证服务。