技术讲解链霉亲和素纯化介质——一品多用,使用灵活,你get到了吗?
链霉亲和素纯化介质——一品多用,使用灵活,你get到了吗?

产品简介

链霉亲和素(Streptavidin)是一种由同一亚基组成的四聚体蛋白。每个亚基与一个生物素分子结合,具有高度的亲和力和特异性。生物学上常将链霉亲和素包被在磁珠或琼脂糖凝胶上,借助链霉亲和素-生物素高亲和力结合特性,结合生物素化蛋白、多肽、及非蛋白质(如各种DNA、RNA分子)等分子,进而从混合体系中快速分离生物素化成分,进行如亲和纯化,细胞分离,DNA探针分析和mRNA分离等多方面应用。
表1.链霉亲和素可特异性结合的标签
名称 | 结合能力 | 蛋白纯化洗脱条件 | 推荐应用 |
生物素 | 强 | 强力变性缓冲液 | 固定生物素化抗体纯化抗原,或固定生物素化蛋白来分离其他蛋白 |
亚氨基生物素 | 较强 | 酸性pH=4 | 纯化带此标签的蛋白,可重复使用。 |
Streptavidin Agarose Resin 6FF将链霉亲和素固定在高度交联的6%琼脂糖表面,主要用来纯化亚氨基生物素标记的蛋白、抗体、核酸等物质,或者是固定生物素化抗体后纯化蛋白。

图1. Streptavidin Agarose Resin 6FF产品应用图示
Streptavidin (SAV) MagBeads是将链霉亲和素(streptavidin)固定在聚合物磁性微球上,借助链霉亲和素-生物素高亲和力结合特性,与生物素化蛋白、抗体及核酸(统称生物素化分子)等形成固定层,进而分离和与生物素化分子相互作用的靶分子,可用于亲和纯化,细胞分选,蛋白互作,DNA-蛋白质相互作用,探针捕获和mRNA分离等多方面应用。
示意图 | 应用方向 | 图解 |
| 抗原纯化/富集 |
|
| 抗体纯化 |
|
或
| 免疫检测 |
|
| 探针杂交或mRNA分离 |
|
| DNA-蛋白互作 |
|
| 蛋白互作 |
|
图2.Streptavidin (SAV) MagBeads磁珠产品应用图示

产品特性

配体 | Streptavidin | Streptavidin |
基质 | 高度交联的6%琼脂糖微球 | 聚合物磁性微球 |
粒径 | 45~165 μm | 1 μm |
载量 | >200 nmoL Biotin/mL介质 | 20μg biotinylated IgG/mg磁珠 |
得率 | ++ | +++ |
特异性/纯度 | + | +++ |
产品特性 | 琼脂糖微球是多孔(海绵状)的,其具有较大的表面积-体积比,对抗体结合能力较高。 | 磁珠粒径远远小于琼脂糖微球,使磁珠拥有足够的抗体结合表面积满足高容量的抗体结合,因此,尽管磁珠的抗体结合能力低于琼脂糖,但最终的抗原得率通常与琼脂糖相等或比琼脂糖更高。且使用磁珠时,由于所有的相互作用均发生在磁珠的外表面,磁珠尺寸也更均一,非特异性吸附较低。 |
琼脂糖微球的可变多孔径会使抗体会落入孔内,导致结合受限,并且抗体可能会在洗涤步骤中流失,且非特异性吸附较高。 |

翌圣Streptavidin纯化产品选购指南

产品货号 | 20512ES | 20513ES/20514ES | 47503ES |
英文名称 | |||
中文名称 | 链霉亲和素琼脂糖纯化树脂 | 生物素分子纯化预装柱,1 mL/5 mL | 链霉亲和素(SAV)免疫磁珠 |
基质 | 高度交联的6%琼脂糖微球 | 高度交联的6%琼脂糖微球 | 聚合物磁性微球 |
配体 | Streptavidin | Streptavidin | Streptavidin |
最大压力 | 0.3 Mpa,3 bar | 0.3 Mpa,3 bar | N/A |
载量 | >200 nmoL Biotin/mL介质 | >200 nmoL Biotin/mL介质 | 20μg biotinylated IgG/mg磁珠 |
应用 | 适合孵育法、重力柱小量纯化,推荐实验室规模客户使用。也可搭配蛋白纯化仪用于工业大规模蛋白的纯化,更容易放大规模 | 预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作 | 通过磁性快速分离,应用广泛,使用灵活;专一性高,非特异性干扰少,结合稳定。尤其适用于IP实验。 |

测试结果


图3. Streptavidin Agarose Resin 6FF纯化亚氨基生物素标签蛋白结果电泳图
目的蛋白纯度>95%

图4. Streptavidin (SAV) MagBeads磁珠用于IP图示

产品信息

产品名称 | 产品编号 | 规格 |
20512ES08/25/60 | 5 mL/ 5×5 mL/ 100 mL | |
BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 1mL 生物素分子纯化预装柱,1mL | 20513ES03/08 | 1 mL/5×1 mL |
BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 5mL 生物素分子纯化预装柱,5mL | 20514ES08/25 | 5 mL/5×5mL |
47503ES03/08 | 1 mL/5×1 mL |
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