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40310ES检测结果出现假阳性:对照细胞经染色后Annexin V-PE/7-AAD 双阳性比例过高,该怎么处理?

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40310ES检测结果出现假阳性:对照细胞经染色后Annexin V-PE/7-AAD 双阳性比例过高,该怎么处理?

实验中发现未经诱导凋亡的对照细胞经染色后Annexin V-PE/7-AAD 双阳性比例过高,造成这种结果的原因可能是细胞本身活力低。建议用台盼蓝染色计算细胞活力,阴性对照台盼蓝拒染的细胞应大于 95%。若细胞活力低,建议重新复苏细胞,通常刚复苏的细胞至少应传代 2-3 次以后才能进行实验。另一可能是细胞操作不当引起,操作过程中吹打细胞过于剧烈,贴壁细胞消化过程中消化时间过长,均可能导致细胞膜破坏,出现假阳性。此外,一般情况下诱导几个小时就可以出现早期凋亡,因此通常不需要处理大于 48 h 以上;诱导时间过长会使营养物质耗尽,导致细胞状态差,假阳性结果偏高。

细胞分析 👁 40

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