Q：
为什么出现双峰，双峰 Tm 都在 80℃以前？
双峰Tm 都在 80℃以前的可能原因：做 MicroRNA 定量时存在引物二聚体。Micro RNA 反转录后定量， 产物在 80-90bp 左右，峰对应Tm 值为 70-80℃，若有引物二聚体存在，引物二聚体大小只有几十 bp，峰对应 Tm 值也在 70-80℃之间。故会在 80℃ 以前出现双峰。
优化方法：提高退火温度、降低引物浓度或重新设计引物等方式优化。
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