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10623ES IVT反应20ul体系放大到10ml,产量下降,单位体积产物得率下降约50%;你们是否遇到过这种情况,有何建议?

Q:

10623ES IVT反应20ul体系放大到10ml,产量下降,单位体积产物得率下降约50%;你们是否遇到过这种情况,有何建议?

20uL体系等比放大到10mL应该得率差不多的,我们一般从20uL直接放大到50mL,得率基本也在100ug/20uL的水平;我们50mL也会用离心管和金属浴的方式来测,10mL正常来说应该放大效果更好;这种情况下,一般建议酶和NTP的终浓度微调一下再试试。

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