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10906ES连接反应体系和反应时间以及温度对连接效率的影响大吗?

Q:

10906ES连接反应体系和反应时间以及温度对连接效率的影响大吗?

建议反应体系应控制在10 μL内,体系太小连接会受到影响。如果目的基因浓度太低,建议浓缩之后再连接,以提高连接成功率。插入片段使用量参考说明书。连接反应不可于冰上进行。室温(20-37℃)下孵育时,建议孵育时间不超过5 min,如果PCR产物浓度较低或者片段较长,则可以适当延长孵育时间,不宜超过15 min(推荐使用25℃,PCR仪控温)。

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