11202ES预变性 5 min 调整成了 10min，对于实验结果有影响吗？

有影响，预变性时间较长可能会影响酶的活性，导致 PCR 产物的产量有所降低。Q：qPCR 实验结果的有效性？为什么建议Ct 值要大于 15？
有效性要满足三个条件：（1）标准曲线：扩增效率范围:90-110%，对应斜率为 -3--3.5。 R2＞0.98。 (扩增效率=10-1/斜率-1)，当斜率=-3.32 时，扩增效率=100%。（2）扩 增曲线：S 型曲线，且 Ct 值在 15－35 之间，阴性对照 Ct＞35 或无 Ct 值。（3）熔解曲线：为单一峰。
Ct 值大于 15 个循环是因为 3-15 个循环的荧光值标准差的 10 倍是荧光阈值，Ct 值太小了会影响曲线。