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20350ES预染蛋白Marker电泳后清晰,但是转膜后颜色变淡?

Q:

20350ES预染蛋白Marker电泳后清晰,但是转膜后颜色变淡?

通常情况下,转膜后预染marker条带会更鲜亮,如果颜色变淡,可能有几种情况:
(1)转印不完全
操作不当,比如,转膜没有加冰袋,温度过高;胶和滤纸没夹紧。
转膜条件不适合,转膜时间过长可能透膜,转膜时间过短,蛋白可能残留在胶内。
膜没有充分活化,甲醇浓度太高易造成蛋白穿膜,转移到滤纸上;未活化可能也可能导致膜吸附蛋白能力不强。
膜孔径不适合,建议小分子蛋白使用0.22um膜。
(2)转印正常,可能使用了特殊的转膜缓冲液,建议使用通用转膜缓冲液,或品质有保障的商用转膜缓冲液如翌圣快速转膜液。另外转膜液均不需要加SDS,若实验必须使用,建议SDS浓度不要超过0.02–0.04%。

蛋白分析 👁 39

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