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应用方向耐dUTP高保真酶,助力DNA甲基化测序

📂 工具酶类型 ID 5003

👁 6,901 次浏览 🗓 2026-10-12 源站内容 ID：3223

DNA聚合酶是PCR反应的核心组分，广泛应用于生物及医学研究等领域。DNA甲基化测序是研究生物体内基因调控的重要技术手段，越来越多地应用于肿瘤早筛、诊断等技术中。常规高保真酶不能以含有dUTP的DNA作为扩增模板，因此需要经过特殊改造耐受dUTP，从而应用到甲基化文库构建或者定点突变等技术中。

来源：翌圣生物｜原文：https://www.yeasen.com/solutiondetail/3223 ↗

DNA聚合酶是PCR反应的核心组分，广泛应用于生物及医学研究等领域。对于普通PCR，常规热稳定DNA聚合酶（如Taq DNA聚合酶）即可满足需求。但对于高通量测序，扩增产物的准确性非常关键，优选高保真酶进行扩增。

DNA甲基化测序是研究生物体内基因调控的重要技术手段，越来越多地应用于肿瘤早筛、诊断等技术中。全基因组重亚硫酸氢盐测序（WGBS）是甲基化检测的金标准，在WGBS文库构建过程中，样本DNA经重亚硫酸氢盐处理后，非甲基化的胞嘧啶（C）会转化为尿嘧啶（U），甲基化的C则保持不变。在后续PCR扩增中U会转变为胸腺嘧啶（T），但常规高保真酶不能以含有dUTP的DNA作为扩增模板，因此需要经过特殊改造耐受dUTP，从而应用到甲基化文库构建或者定点突变等技术中。

图1. WGBS建库的两种技术路线[1]

Hieff Canace^® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase是翌圣经过定向改造，针对含尿嘧啶（U）模板推出的一款高保真DNA聚合酶，具备优良的扩增性能。产品本身不仅具备高扩增效率、高灵敏度和高特异性，而且酶本身各项残留均很低，满足各种模板类型的扩增需求。

性能展示

01 高扩增产量：与进口品牌K*产量相当

图3. A：分别使用翌圣Yeasen（橙）、和品牌K*（蓝）、N*（绿）、V*（灰）在100ng Bisulfite 处理后DNA起始量实验条件下建库，建库纯化后文库产量高于其它品牌。

B: 分别使用翌圣Yeasen（橙）、和品牌K*（蓝）、N*（绿）、V*（灰）在100ng λDNA起始量实验条件下建库，建库纯化后文库产量与品牌K*相当，高于品牌N*以及V*。

02 无切口酶残留

图4. 切口酶残留结果：跑胶结果显示Hieff Canace^® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase与阴性对照（C）一致，无切口酶残留。

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耐dUTP扩增酶

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (1 U/μL)

10145ES

高浓度耐dUTP扩增酶

Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase (3 U/μL)

Hieff Canace® 耐U+高保真DNA聚合酶 (3 U/μL)

14384ES

高效率TdT末端转移酶（带buffer）

Terminal Deoxynucleotidyl Transferase

TdT末端转移酶

10302ES

高效率TdT末端转移酶（不含buffer）

Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (20U/μL, without buffer)

TdT 末端转移酶

14456ES

高效率连接酶

E. coliDNA ligase (60 U/μL)

14955ES

DNA纯化/分选磁珠

Hieff NGS® DNA Selection Beads

12601ES

文库定量试剂盒

dsDNA HS Assay Kit

12640ES

甲基化建库试剂盒

Hieff NGS® Methyl-seq DNA library Prep kit for Illumina

甲基化DNA建库试剂盒

12211ES

来源与原文

来源： 翌圣生物

原文链接： https://www.yeasen.com/solutiondetail/3223

源站内容 ID：3223

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