ApplicationsAnti-Flag亲和纯化凝胶 ——IP/蛋白纯化好帮手

在生物医学研究领域，蛋白纯化是探索生命奥秘的关键技术。然而，传统的纯化方法往往使普通的蛋白纯化面临着低效率、高成本的困境，对于结构复杂但功能多样的膜蛋白（蛋白结构学的重点研究对象，在细胞膜中低丰度表达且对环境敏感），传统的纯化方法更是使纯化过程困难重重。

如今，翌圣生物凭借其卓越的研发实力，推出了全新升级的Anti-Flag亲和纯化凝胶（分泌蛋白或膜蛋白）（Cat#20585ES，由高质量的鼠源IgG2b单克隆抗体（克隆号：3F5）与4%高度交联的琼脂糖凝胶通过共价偶联制备），可用于带有Flag标签的融合蛋白（分泌蛋白或膜蛋白）纯化和免疫沉淀（IP）。

此外，翌圣还提供Anti-Flag亲和纯化凝胶（分泌蛋白）（Cat#20584ES，抗体克隆号：1A3）, 尤其适用于带有Flag标签的分泌蛋白的纯化。

高特异性：选用高质量的鼠源IgG2b单克隆抗体，能够特异性吸附Flag蛋白序列。

高 载 量：载量≥1.1 mg蛋白/mL凝胶。

高 纯 度：杂蛋白非特异结合少，得到高纯度的Flag标签蛋白。

用途广泛：可用于蛋白质纯化或IP。

结合蛋白类型多：可结合Met修饰的N端Flag融合蛋白（Met-Flag–Protein），N端Flag融合蛋白（Flag–Protein），C端Flag融合蛋白（Protein-Flag）

1）翌圣Anti-Flag亲和纯化凝胶（分泌蛋白）（Cat#20584ES）纯化原核表达的N端Flag融合蛋白（Flag-N），Met修饰的N端Flag融合蛋白（Flag-M），C端Flag融合蛋白（Flag-C）。

图1： Yeasen Anti-Flag亲和纯化凝胶（分泌蛋白）纯化结果跑胶图

结果显示：Anti-Flag亲和纯化凝胶（分泌蛋白）（Cat#20584ES）特异性高，并能结合多种位置的Flag标签。

2）翌圣Anti-Flag亲和纯化凝胶（分泌蛋白）（Cat#20584ES）与国外进口品牌S*纯化对比测试。

图2 ：Yeasen（a) PK进口品牌S*(b) Anti-Flag凝胶对比测试跑胶图

图3：Yeasen（a) PK进口品牌S*(b) Anti-Flag凝胶每mL凝胶纯化蛋白得率对比测试结果

结果显示：翌圣Anti-Flag亲和纯化凝胶（分泌蛋白）的载量和目的蛋白得率均明显高于竞品。

3）翌圣Anti-Flag亲和纯化凝胶（分泌蛋白或膜蛋白）（Cat#20585ES) 纯化低表达的N端Flag融合蛋白（Flag-N），Met修饰的N端Flag融合蛋白（Flag-M），C端Flag融合蛋白（Flag-C）。

图4.Yeasen Anti-Flag亲和纯化凝胶（分泌蛋白或膜蛋白）纯化低表达量蛋白结果跑胶图

结果显示：Anti-Flag亲和纯化凝胶（分泌蛋白或膜蛋白）（Cat#20585ES) 特异性高，在目的蛋白表达量极低的条件下，也能结合多种位置的Flag标签。

4）翌圣Anti-Flag亲和纯化凝胶（分泌蛋白或膜蛋白）（Cat#20585ES) 与国外进口品牌S*、品牌G*纯化对比测试。

图5：Yeasen（a) PK进口品牌S*(b)、品牌G*(c)Anti-Flag凝胶纯化低表达量蛋白结果对比测试跑胶图

结果显示：在目的蛋白表达量极低的条件下（比如膜蛋白）， Yeasen Anti-Flag亲和纯化凝胶（分泌蛋白或膜蛋白）（Cat#20585ES)得到的目的蛋白得率、纯度明显优于竞品，且使用Yeasen搭配赠送的1×Flag多肽(Cat#20572ES)洗脱效果更佳。

重组肠激酶（Cat#20395ES）：特定的蛋白酶，切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点：Asp-Asp-Asp-Asp-Lys，DDDDK是八肽Flag标签(DYKDDDDK)的一部分。重组肠激酶（rEK）的使用可以轻松去除融合蛋白的Flag标签，是研究天然蛋白质结构和功能的理想工具。

Anti-Flag纯化磁珠（高载量）（Cat#20758ES）：一种聚合物磁性微球，由生物素化抗DYKDDDDK（Flag）标签抗体与链霉亲和素（SA）琼脂糖磁珠（平均粒径约为70 μm）偶联制备而成，可通过磁性分离直接从生物样品中一步纯化出高纯度的Flag融合蛋白。

Anti-Flag纯化磁珠（Cat#20785ES）：一种聚合物磁性微球，由高质量的鼠源抗DYKDDDDK（Flag）单克隆抗体与琼脂糖磁珠（平均粒径约为70 μm）通过共价偶联制备，可用于Flag标签蛋白的纯化，也可用于带有Flag标签的蛋白免疫沉淀（IP）或免疫共沉淀（Co-IP）。

Anti-Flag免疫磁珠（Cat#20565ES）：一种聚合物磁性微球，由高质量的鼠源抗DYKDDDDK (Flag) 单克隆抗体与粒径为200 nm的硅基磁珠通过共价偶联制备，可用于带有Flag标签的蛋白免疫沉淀（IP）或免疫共沉淀（Co-IP）。同时提供Flag标签蛋白免疫（共）沉淀试剂盒（Cat#20765ES），包含实验所需必要试剂，更方便客户直接使用。