News有福利！翌圣肝素亲和纯化介质上线,预定有惊喜

Heparin Agarose 6FF肝素亲和纯化介质是将肝素通过共价结合到交联琼脂糖基质而得到的一类亲和层析介质。利用肝素与蛋白质的相互作用，选择性结合目的蛋白。

肝素是一种高度硫酸化的多糖。肝素的结构中大量存在的磺酸基和乙酸基让肝素成为已知酸性（电负性）最强的物质之一，也使肝素可以与其他带正电的基团形成离子键，发挥阳离子交换作用；葡萄糖胺骨架中的仲氨基也可以与其他物质形成氢键。两种作用力是肝素与肝素结合蛋白亲和作用所必须的。由于肝素与蛋白质相互作用以静电力为主，这为肝素亲和层析的使用带来便利，一般情况下通过改变缓冲液中的盐浓度即可实现目的蛋白的结合、清洗和洗脱。

与一般层析介质的不同之处在于，肝素选择性结合的蛋白种类多种多样，因此广泛应用于不同蛋白质及病毒的纯化过程。

以DNA聚合酶的纯化为例，实验步骤如下表：

表1.DNA聚合酶纯化实验步骤

图1. Heparin Agarose 6FF层析图谱

图2. Heparin Agarose 6FF纯化结果电泳图洗脱峰A4-A5纯度大于95%

表2.竞品回收率对比图

肝素本身在低pH 不稳定，因此使用时应该避免 pH＜4 的条件。

避免使用离子型去污剂。

用后处理使用2 M NaCl 清洗离子结合蛋白，可以使用 6 M 盐酸胍或 8 M 尿素清洗沉淀或变性蛋白，使用非离子去污剂清洗疏水结合蛋白。

推荐的CIP条件为 4 CV 的 0.1 M NaOH 处理 1-2 h。

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