Buying Guides上新 | 细胞扩增慢、状态易波动?人血小板裂解物hPL为何让细胞培养更高效、更稳定?
在哺乳动物细胞培养中,胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)一直是最常用的培养基补充物之一。它能够提供细胞生长所需的蛋白质、生长因子、激素及黏附相关成分,因此被广泛应用于多种细胞培养体系。但在使用FBS实际培养过程中,您是否遇到过以下问题:MSC扩增速度和状态不理想?换一批FBS,细胞状态就开始波动?做细胞治疗或再生医学项目,又担心异种成分
但在使用FBS实际培养过程中,您是否遇到过以下问题:
MSC扩增速度和状态不理想?
换一批FBS,细胞状态就开始波动?
做细胞治疗或再生医学项目,又担心异种成分给后续研究和转化增加负担?
FBS虽然应用成熟,但其批次间差异、异种成分引入及潜在动物源风险等问题,也促使研究人员不断探索更适合人源细胞的培养方案。
尤其对于间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSC)、原代细胞及部分对培养条件较为敏感的细胞,如何在保证细胞增殖效率和功能状态的同时,提高培养体系的稳定性与人源化程度,已成为越来越受关注的问题。
在这样的背景下,人血小板裂解物(Human Platelet Lysate,hPL)逐渐成为FBS之外的重要选择。那么,人血小板裂解物究竟是什么?它有什么优势?它和传统FBS培养/无血清培养相比有什么区别?哪些细胞适合使用?实际培养时又有哪些需要注意的问题?
本文,小翌将结合科研应用场景,为大家逐一介绍。
人血小板裂解物是什么?
血小板裂解物(hPL,即Human Platelet Lysate)是以人源血小板为原料,通过特定裂解工艺释放血小板内部生物活性物质后制备得到的一款细胞培养补充物,可完美替代胎牛血清(FBS)及人AB血清等传统动物源细胞培养添加剂,所以也称为血清替代物,简称“血替”。
我们通常会把血小板和凝血联系在一起,但实际上,血小板也是一个丰富的生长因子“储存库”。血小板内部的α颗粒中储存着多种与细胞增殖、迁移、黏附及组织修复相关的生物活性成分,经过裂解后,这些成分被释放到液相中,从而形成一种富含人源生长因子和蛋白质的培养补充体系。

图1. 血小板裂解物来源于应用示意图
1. MSC及其他人源细胞规模化培养
HPL可作为人源化培养补充物,用于 MSC 及多种人源细胞的体外扩增,有助于减少动物源成分的使用,并维持细胞的增殖和功能特性。
2. 免疫细胞与细胞治疗
HPL可用于CAR-T、NK等免疫细胞的培养与扩增,为细胞治疗产品提供更适合无异种成分体系的培养条件。
3. 再生医学与组织修复
HPL富含多种生长因子,可促进细胞增殖、迁移和组织修复,目前已在创面修复、骨软骨再生及眼表修复等方向开展研究与临床转化探索。
4. 前沿科研与组织工程
HPL 可用于三维细胞培养、类器官及组织工程等研究,为疾病模型构建、药物筛选和再生医学研究提供人源化培养支持。
传统血清?人血小板裂解物?无血清培养?该怎么选?
传统细胞培养是在基础培养基中添加动物源血清(最常用胎牛血清FBS和人AB血清)配成完全培养基进行细胞体外培养,是经典的细胞培养体系。
表1 胎牛血清、人AB血清和人血小板裂解物产品对比
胎牛血清(FBS) | 人AB血清 | 人血小板裂解物(hPL) | |
产品来源 | 母牛腹中未出生胎牛的血液 | 健康AB血型献血者的血液 | 健康献血者的血液 |
是否为血清 | 是 胎牛血清产物 | 是 人血清产物 | 否 人血小板裂解产物 |
主要特点 | 经典、广泛使用的培养补充物 | 缺少抗A、B血型抗原的抗体 | 富含多种天然人源活性成分 |
安全性 | 含有异种成分 免疫原性高 存在异种污染、TSE/BSE和伦理风险 | 不含异种成分 免疫原性低 避免异种污染和TSE/BSE风险 | 不含异种成分 免疫原性低 避免异种污染和TSE/BSE风险 |
稳定性 | 供给不稳定 批次间差异大 | 供给不稳定 原料获取难 | 大批量生产更容易 多供体混合,批次间差异小 |
MSC扩增培养 | 可以适用 | 可以适用 | 可以适用 细胞扩增数量高、速度快、形态更稳定 |
适合场景 | 广泛适用多种细胞 | 广泛适用多种细胞 主要用于脂肪来源间充质干细胞、人骨髓来源间充质基质细胞和外周血来源NK细胞 | 更贴合人源细胞 主要用于人类MSCs/内皮细胞和成纤维细胞 |
相比传统动物源血清FBS和人AB血清,翌圣44506ES-CelCulSF™ Human Platelet Lysate (hPL)人血小板裂解物具有以下优势:
1. 安全可追溯:源自欧盟认证血库,无异种成分,不含肝素,无内毒素,避免异种污染和TSE/BSE风险。
2. 稳定可重复:单批产量大,批间一致性高,保障实验结果具备良好可重复性。
3. 高效促增殖:可显著促进细胞增殖,同时维持干细胞克隆形成能力、三系分化潜能以及对T细胞免疫抑制活性。
4. 广谱适用性:支持MSC、T细胞、iPSC、肿瘤细胞、成纤维细胞等多种细胞2D/3D体外培养。
5. 轻松替血清:可直接替代胎牛血清(FBS)及人AB血清等传统动物源细胞培养添加剂,是理想的血清替代物。
传统血清(FBS)VS人血小板裂解物(hPL)
培养MSC细胞状态对比图:

10% 翌圣40132ES-FBS

图2. 相同实验条件下,10%胎牛血清和5%人血小板裂解物培养的MSC细胞形态无差异,且5%人血小板裂解物培养的MSC细胞密度更高。

图3. 相同实验条件下,对比10%胎牛血清(FBS),5%人血小板裂解物(hPL)培养的MSC群体倍增数更高。
无血清培养是指细胞培养基中不添加任何天然动物或人来源血清(胎牛血清FBS、人AB血清等)支持细胞生长、增殖和功能维持的细胞培养体系。主要可以细分为:
1. 非化学成分限定无血清培养:无血清培养基/基础培养基+血清替代物(血小板裂解物、人血清白蛋白、蛋白水解物等)
2. 化学成分限定无血清培养:无血清培养基/基础培养基+血清替代物(生长因子如重组细胞因子或小分子化合物等)
表2 人血小板裂解物VS化学成分限定无血清培养对比
化学成分限定无血清培养 | 人血小板裂解物(hPL) | |
活性因子来源 | 重组细胞因子或小分子化合物等 | 人血小板富含多种天然人源活性成分 |
主要特点 | 化学成分明确,需额外复溶配制,成本较高 部分细胞体系切换需经过驯化,适应周期较长 MSC与NK体外扩增效率低 | 成分不完全明确,即开即用,成本有优势 体系切换便捷,适应周期短 MSC与NK体外扩增效率高 |
稳定性 | 批次间稳定性更高 | 批次间稳定性高 |
安全性 | 不含异种成分 避免异种污染和TSE/BSE风险 | 不含异种成分 避免异种污染和TSE/BSE风险 |
适合场景 | 广泛适用多种细胞 比较依赖细胞类型/组织来源,部分细胞需要适应或优化 | 广泛适用多种细胞 主要用于人类MSCs/内皮细胞和成纤维细胞 |
血小板裂解物常见问题FAQ
A1: 血小板裂解物(HPL)是一种富含多种生物活性成分的蛋白质混合物,总蛋白浓度通常超过 40 mg/mL,主要包括白蛋白(30~35 mg/mL)和免疫球蛋白G(8~12 mg/mL)。根据制备和处理工艺的不同,HPL中纤维蛋白原含有量不同,经反复冻融或S/D工艺制备的HPL,纤维蛋白原含量通常约为1~3 mg/mL。HPL还富含多种生长因子,如IGF-1、PDGF、TGF-β1、EGF、VEGF、HGF和bFGF等,浓度多在0.1~300 ng/mL,可支持细胞的增殖、迁移和分化。此外,HPL还含有钠、钾、镁、铁等矿物质,以及葡萄糖和维生素等营养成分。
A2: 血小板裂解物(hPL)适用于各类原代细胞和细胞系,尤其对于人源间充质干细胞、成纤维细胞、免疫细胞(例如T细胞、B细胞、NK细胞、巨噬细胞等)可以完全替代FBS且效果更佳,部分肿瘤细胞(MCF-7、HCC827等)和永生细胞系(HeLa、HEK293、A549、Hep G2等)需优化培养体系。
A: 与传统胎牛血清(FBS)相比,hPL 更符合人源间充质干细胞(MSC)的生长需求,其主要优势包括:
①促进细胞快速扩增:hPL富含PDGF、TGF-β、IGF、FGF等多种生长因子,可以使得MSC培养具有更短的倍增时间和更高的增殖效率。
②维持MSC关键功能:在提高增殖速度的同时,多数研究显示hPL培养的MSC仍能较好保持典型免疫表型、克隆形成能力以及成骨、成脂和成软骨分化潜能,并维持免疫调节功能。
③减少动物源成分风险:hPL来源于人血小板,可减少FBS带来的异种蛋白和动物源病原体风险,更适合构建无异种成分(xeno-free)的细胞培养体系。
总的来说:hPL不仅能让MSC“长得更快”,还能够较好地保持其“干性”和功能,同时减少动物源成分的引入,因此大规模扩增。
A: hPL常规最佳添加浓度为1%~10%(v/v),具体最优添加浓度需依据细胞类型确定。建议10%(v/v)作为起始浓度,通常可获得理想效果,也可根据具体细胞类型与实验需求进行优化。注:请勿过量添加hPL,高浓度hPL会抑制细胞生长。
A: 市面上部分hPL产品中含有一定量的纤维蛋白原,在加入含钙培养基后,可能出现纤维蛋白或凝块形成,因此需要额外加入肝素(738416ES)进行抗凝。翌圣44506ES-CelCulSF™ Human Platelet Lysate (hPL) 人血小板裂解物已利用特殊工艺去除纤维蛋白原,无需再添加肝素。
A: 本产品使用前,需提前在37℃恒温水浴锅中解冻,解冻过程中需轻轻摇动瓶身,直至冰块刚好融化时候立即取出,轻轻摇匀后置于2~8℃备用。
注:①相较于4℃条件下解冻,采用37℃水浴加热法能降低有效成分损耗和减少沉淀生成。②首次解冻后,建议按单次实验需求进行分装并置于-25~-15℃长期保存,避免反复冻融。
A: 解冻后,hPL可能出现轻微颗粒或者沉淀,此为正常现象,通常不影响产品性能。若需要去除轻微颗粒或沉淀,请3400×g,2~8℃离心3-5min或使用40~100 μm细胞过滤筛进行过滤。若仍然浑浊,请8000×g离心5min,取澄清上清液。严禁使用0.22 μm过滤器过滤hPL原液!配制为完全培养基后,可根据需要,选择使用0.22 μmPES过滤器(84303ES)进行过滤。
A: -25~-15℃保存,有效期2年。解冻后,可2~8℃保存,有效期7天,因此建议您按单次实验需求进行分装并置于-25~-15℃长期保存,避免反复冻融。hPL配制成完全培养基后2~8℃保存,有效期7天。
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参考文献
[1] Thierry Burnouf, Dirk Strunk, Mickey B.C. Koh et al. Human platelet lysate: Replacing fetal bovine serum as a gold standard for human cell propagation?[J].Biomaterials, 2016, 76, 371-387.https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2015.10.065
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