Techniques一步搞定组织消化难题!
一步搞定动物组织和肿瘤组织等原代培养的消化解离
原代细胞(Primary cells)是指直接从机体取出的组织或细胞获得单个细胞并在体外进行培养的细胞。组织主要指:组织器官、外周血及胚胎等,这些细胞保留了其在生物体内的基本生物学特性和功能。针对不同的组织解离可选用不同的胶原酶、分散酶、弹性蛋白酶和透明质酸酶等,选择较为复杂,Cebrary®Tissue Digestion Solution组织消化液(10x)能将不同动物组织样本温和、快速地消化解离为细胞悬液或细胞团块,可用于后续类器官的构建和细胞分离培养。该组织消化液广泛适用于多种实体肿瘤及正常组织标本在体外原代培养的消化解离。

应用方向
适用于组织消化包括正常动物组织和肿瘤组织等原代培养的消化解离。
产品特点
组分明确:组分明确,无动物源成分;
安全性高:反应过程温和,对细胞损伤小,细胞活率高;
批次稳定性好:严格生产质检过程保证批次间性能稳定;
污染物检测: 经检测无支原体、细菌和真菌残留;
单批产量高:单批产量在10L级别以上;
保质期久:10x浓缩原液,保质期长达2年;
兼容性好:可与大部分类型的体组织和肿瘤组织兼容。
组织消化过程
将动物组织(以肿瘤组织为例)样本放入生物安全柜内,去除组织表面坏死、纤维化或凝结血块等活性不良组织,用预冷的含原代抗生素的DPBS清洗数次;
使用手术剪刀或组织解离器将组织剪切成1-3mm小块,将组织碎块转移至50mL 离心管中,预冷的含原代抗生素的 DPBS清洗数次;
弃去DPBS,保留组织沉淀,向离心管中加入适量无血清培养基,加入1/10体积的组织消化液,用封口膜将离心管密封,置于37℃水浴箱或恒温水浴播床中进行组织消化。根据组织类型不同,消化时间控制在 30min左右,难消化的组织亦可多次消化;
消化完成后,使用1ml的移液枪或者无菌巴氏滴管吹打悬液20-50次,使细胞与结缔组织充分分离:加入适量血清或者BSA溶液削弱消化甚至终止消化;
收集上清含细胞液体,用70μm-100μm 滤网过滤,去除杂质;
无菌收集滤液后,4℃,800-1200rpm/min,离心5min;弃去上清,保留细胞沉淀;
DPBS 再次清洗细胞沉淀后,4℃、800-1200rpm/min,离心5 min;
弃去上清,保留细胞沉淀用于后续类器官培养。
注意事项:消化酶须在37度左右效果最好,收集后的细胞4度短暂保存,可依据组织性质,适当调整消化液用量比例,一般8%-12%。
消化结果

产品订购
产品类型 | 产品名称 | 产品编号 | 规格 |
组织消化液 | 41423ES10/30/60 | 10/30/100 mL |
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