技术讲解市场验证,好评如潮!这款试剂盒,实现超高克隆连接效率!
翌圣生物的通用型多片段一步法快速克隆试剂盒(Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit,Cat#10923ES)自上市以来,经过大量内部实验与广泛的市场验证,收获了众多科研用户的积极反馈。效果这么好,我们实在等不及啦——今天就来和大家分享一波使用体验!客户试用反馈//6 μL小体系长载体高效率重组中国科学院基
翌圣生物的通用型多片段一步法快速克隆试剂盒(Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit,Cat#10923ES)自上市以来,经过大量内部实验与广泛的市场验证,收获了众多科研用户的积极反馈。效果这么好,我们实在等不及啦——今天就来和大家分享一波使用体验!
客户试用反馈
6 μL小体系长载体高效率重组
中国科学院基础医学与肿瘤研究所:单片段连接
实验信息:载体11786 bp,目的片段700 bp

图1. 10923ES在6 μL小反应体系下,低浓度长载体(32 ng)连接单片段,连接效率高于竞品,阳性率100%。A:重组转化平板。B:插入片段测序鉴定图。
客户评价:效果很好!
低浓度载体高效率重组
上海科技大学:单片段连接
实验信息:载体9000 bp,目的片段1000 bp
图2. 10923ES在低浓度载体(50 ng)条件下,连接单片段,连接效率高,菌落数多于竞品,阳性率100%。A:重组转化平板。B:插入片段测序鉴定图。
小体系低浓度载体高效率重组
上海交通大学:单片段连接
实验信息:载体5369 bp,目的片段1589 bp

图3. 10923ES在10 μL小反应体系下,低浓度载体(30 ng)连接单片段,阳性率100%。A:重组转化平板。B:插入片段PCR鉴定电泳图,泳道1-5分别为菌落1,菌落2,阴性对照,阳性对照(基因组作为模版),阳性对照(PCR纯化片段作为模版)。
客户评价:实验效果较好,挑选两个克隆点都连接成功!
小体系5分钟快速高效率重组
四川农业大学:单片段连接
实验信息:载体7200 bp,目的片段1800 bp

图4. 10923ES在10 μL小反应体系下,快速5 min连接单片段,连接效率高,阳性率高(11/12)。A:重组转化平板。B:插入片段PCR鉴定电泳图。
超短片段高效率重组
浙江大学:单片段连接
实验信息:载体5000 bp,目的片段72 bp
图5. 10923ES连接72 bp超短片段(20 ng),菌落数多于竞品,阳性率高。A:重组转化平板。B:插入片段测序鉴定图。
客户评价:效果较好!8kb长片段克隆效率高
南京农业大学:8kb长片段连接
实验信息:载体15000 bp,目的片段8000 bp
图6. 10923ES在连接8kb单片段,其中载体投入1μL(约100ng),片段投入1μL(约100ng),克隆试剂加入5 μL,加水2μL。克隆数多于竞品,阳性率表现也优于竞品。
客户评价:长得更多。
小体系5分钟快速高效率重组
武汉大学:单片段连接
实验信息:载体1600 bp,目的片段1000 bp
图7. 10923ES在10 μL小反应体系下,阳性率高。A:重组转化平板。B:插入片段PCR鉴定电泳图。(武汉大学)
客户评价:试剂效果不错,克隆效率高!小体系长载体高效率重组
河南农业大学:单片段连接
实验信息:载体10000 bp,目的片段1011 bp
图8. 10923ES在10 μL小反应体系下,低浓度长载体(50 ng)连接单片段,阳性率高。A:重组转化平板。B:插入片段PCR鉴定电泳图。
客户评价:好用!多片段低浓度载体高效率重组
中国科学技术大学:二片段连接
实验信息:载体5400 bp,目的片段1500 bp,66 bp
图9. 10923ES在低浓度载体(45 ng)下连接二片段,菌落数多,阳性率高。A:重组转化平板。B:插入片段测序鉴定图。
客户评价:使用较为方便!
多片段高效率重组
上海科技大学:三片段连接
实验信息:载体8253 bp,目的片段1246 bp,970 bp,330 bp
图10. 10923ES连接三片段,连接效率高,阳性率100%。A:重组转化平板。B:插入片段PCR鉴定电泳图。
多片段连接阳性率高
浙江大学:三片段连接
实验信息:载体约12500 bp,目的片段3000 bp、2600bp、3800bp

图11. 同时连接插入3个片段。菌P结果显示,阳性率更好。
客户评价:多片段连接,各挑8个菌P,翌圣阳性更多。
明星产品推荐
翌圣新品通用型多片段一步法快速克隆试剂盒(Cat#10923ES),该产品连接效率高,菌落数多,满足超小体系连接。
产品特点

定向:可满足1-7个DNA片段的定向无缝拼接;
简便:片段无需酶切,多片段连接一管内即可完成;
快速:最快5分钟即可完成连接反应;
高效:克隆生长数多,克隆阳性率可达95%以上;
广泛:适用于任何载体,兼顾粘性和平末端;可用于多片段、点突变等的克隆;
超长:载体片段连接长度可达25 kb以上。
产品性能
超小体系单片段连接

图12:10923ES超小体系连接1 kb单片段,连接效率高,菌落数多,阳性率达100%。3 μL总体系连接,10923ES的投入量可低至1 μL。A&C&E&I:50 ng载体(11.6 kb)+10 ng片段(1 kb);G:25 ng载体+5 ng片段。B&D&F&H&J:插入片段PCR鉴定电泳图。
可满足多片段连接

图13:10923ES升级版可满足多片段连接,连接效率高,菌落数多,引物科学设计且片段纯化条件下至多可满足10片段插入。分别进行6片段插入和10片段插入实验,连接总体系为20 μL。A:6片段插入克隆生长情况;B:10片段插入克隆生长情况;C:6片段插入克隆菌P鉴定;D:10片段插入克隆菌P鉴定。
反复冻融无影响


图14:10923ES升级版冻融无影响,通过反复的完全冰冻和4℃解冻进行测试,结果显示产品冻融对产品不会产生影响。以反复冻融40次的试剂盒分别连接单片段和六片段,同比正常保存对照,性能无差异。
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产品定位 | 名称 | 货号 | 规格 |
1-7片段一步法定向连接,最快5分钟完成重组反应 | Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit | 20 T/50 T | |
5 min快速完成感受态转化 | F DH5α化学感受态 | 10×100 μL | |
二代快速PCR、快至1秒/kb | 2× Hieff® Ultra-Rapid II HotStart PCR Master Mix | 1 mL/5×1 mL | |
长片段高保真PCR | 2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) | 1 mL/5×1 mL | |
琼脂糖 | Agarose琼脂糖 | 100 g/500 g | |
无毒核酸染料 | YeaRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) YeaRed 核酸染料(10,000× 水溶液) | 500 μL |
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