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应用方向蛋白纯化介质——快速选择高效的纯化树脂

📂 蛋白纯化类型 ID 5003

👁 14,460 次浏览 🗓 2026-10-12 源站内容 ID：2145

对目的蛋白的功能、结构和相互作用研究时，常常会用到蛋白纯化介质。Yeasen为您提供多种优良的亲和层析介质，可批量或利用重力进行纯化，可以高效、便捷、可靠地从您的样品中分离蛋白和抗体，为下游应用提供良好保证。

来源：翌圣生物｜原文：https://www.yeasen.com/solutiondetail/2145 ↗

背景描述：

表1蛋白纯化产品性能及应用

名称	性能（/mL填料）	粒径（µm）	应用
Ni NTA Beads	>40mg 6XHis-tagged protein	45-165	用于His标签蛋白的纯化，其配体为稳定的四配位结构，该产品可以耐受比较苛刻的化学试剂，因此，该产品具有较广泛的应用范围，可以针对包涵体和可溶蛋白的纯化。
Ni NTA 6FF Beads	>40mg 6XHis-tagged protein	45–165	可用于可溶蛋白和包涵体的纯化，因其耐压的骨架，可以应用于大规模蛋白纯化，更容易放大规模。
Glutathione Beads	> 20mg glutathione	45–165	可以用于快速纯化谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽转移酶的重组蛋白。具有纯化效率高，树脂载量高等特点。推荐实验室规模客户使用。
Glutathione Beads 4FF	~10 mg glutathione	45–165	可以用于快速纯化谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽转移酶的重组蛋白。具有纯化效率高，树脂载量高等特点。因其耐压的骨架，可以应用于大规模蛋白纯化，更容易放大规模。

标签蛋白纯化的选择

1）产品组成

为了有效对其蛋白样品进行纯化且进行后续的实验探究，翌圣公司提供两种不同的产品，一种是填料，一种是预装柱。

树脂：只要以高度交联的琼脂糖凝胶为基质而形成的用来纯化蛋白的树脂，多种树脂供客户选择；

预装柱：由树脂和柱子配置好的成品。

树脂预装柱

2）不同纯化标签的比较

融合标签	大小（kD）	功能
HIS	0.84	有利纯化，能纯化可溶性蛋白/包涵体蛋白
GST	26	增强蛋白可溶性，仅能纯化可溶性蛋白，屏蔽毒性蛋白
MBP	44.4	增强蛋白可溶性，屏蔽毒性蛋白

3）产品使用的方法

简单三步快速纯化

样品上样：将蛋白样品缓慢加入到纯化柱中，请注意加样速度；

平衡/洗杂：Wash Buffer 平衡柱子，直到紫外吸收达到一个稳定的基线。

洗脱：使用5-10倍柱体积Elution Buffer洗脱，收集洗脱液即目的蛋白溶液。

图1蛋白纯化实验流程图

融合标签的分类

1）His标签蛋白琼脂糖纯化树脂

HisSep Ni-NTA Agarose Resin以高度交联的4%琼脂糖凝胶为基质，通过化学方法偶联四配位的氮川三乙酸（NTA）为配体，螯合镍离子（Ni2+）后，形成非常稳定的八面体结构，镍离子处于八面体的中心，这样的结构可保护镍离子免受小分子的进攻，与Ni-IDA树脂相比，更加稳定，可以耐受一定浓度的还原剂、变性剂或耦合剂等苛刻条件。已经成为实验室纯化His标签蛋白不可或缺的树脂之一。

产品特点

His-Tag本身的特性对目的蛋白无影响，不会形成二聚体；

高结合量、高流速，其载量＞40 mg 6×His-tagged protein/mL基质，流速1mL/min；
可与其他标签构建双标前表达，可用于多种蛋白表达系统，纯化条件温和对蛋白影响较小。

产品信息

应用	货号	品名	规格
His标签蛋白纯化	20502ES10	HisSep Ni-NTA Agarose Resin（His标签蛋白琼脂糖纯化树脂）	10 mL
	20502ES50		50 mL
	20502ES60		100 mL
	20503ES10	HisSep Ni-NTA Agarose Resin 6FF （His标签蛋白琼脂糖高速纯化树脂）	10 mL
	20503ES50		50 mL
	20503ES60		100 mL
	20504ES08	HisSep Ni-NTA 6FF Chromatography Column, 5ML （His标签蛋白纯化预装柱，5ML）	5 mL
	20504ES25		5×5 mL
	20505ES03	HisSep Ni-NTA 6FF Chromatography Column, 1ML （His标签蛋白纯化预装柱，1ML）	1 mL
	20505ES08		5×1 mL
洗脱试剂	20501ES60	Imidazole咪唑	100 g
	20501ES76	Imidazole咪唑	500 g
	60379ES76	Urea, molecular biology grade 尿素，分子生物学级x	500 g
	60379ES90	Urea, molecular biology grade 尿素，分子生物学级x	5 kg

2）谷胱甘肽琼脂糖树脂

GSTSep Glutathione Agarose Resin是一种GST标签蛋白纯化树脂，结构上以4%琼脂糖凝胶为基质，通过12个原子的间隔臂，用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成。该设计使树脂的纯化效率得到了较大提高，使其每毫升基质可承载>20 mg GST融合蛋白。本品特异性好，性价比高，可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。

产品特点

高结合量，>20 mg GST protein/mL基质（40 kDa）；

高流速。

产品信息

应用	货号	品名	规格
GST标签蛋白纯化	20507ES10	GSTSep Glutathione Agarose Resin 谷胱甘肽琼脂糖树脂（用于GST标签蛋白纯化）	10 mL
	20507ES50		50 mL
	20507ES60		100 mL
	20508ES10	GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF 谷胱甘肽高速纯化树脂（用于GST标签蛋白纯化）	10 mL
	20508ES50		50 mL
	20508ES60		100 mL
	20509ES03	GSTSep Glutathione 4FF Chromatography Column, 1ML（GST标签蛋白纯化预装柱，1ML）	1 mL
	20509ES08		5×1 mL
	20510ES08	GSTSep Glutathione 4FF Chromatography Column, 5ML（GST标签蛋白纯化预装柱，5ML）	5 mL
	20510ES25		5×5 mL
洗脱试剂	60342ES10	Glutathione,Reduced (GSH) 还原型谷胱甘肽（GSH）	10 g

3）巯基蛋白琼脂糖偶联树脂

SulfoLink Coupling Agarose Resin是一类预活化树脂，其纯化原理在于可以通过与巯基或者氨基的反应实现抗原的固定化，进而利用抗原抗体的特异性反应对免疫血清中的抗体进行高效纯化，是多克隆抗体生产中不可缺少的纯化介质。

产品信息

应用	货号	品名	规格
抗体的纯化	20511ES08	SulfoLink Coupling Agarose Resin 巯基蛋白琼脂糖偶联树脂	5 mL
	20511ES25		25 mL
	20511ES60		100 mL

4）MBP标签蛋白高度交联纯化树脂

MBPSep Dextrin Agarose Resin是一种纯化带有麦芽糖结合蛋白（MBP）标签蛋白的亲和层析介质，MBP可促进连接蛋白的正确折叠，增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF可以一步纯化MBP融合蛋白，结合的融合蛋白可以用10mM麦芽糖进行温和洗脱，保护了目的蛋白的活性，MBP融合部分后续可用位点特异性蛋白酶切除。

产品信息

应用	货号	品名	规格
MBP标签蛋白纯化	20515ES08	MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF （MBP标签蛋白高度交联纯化树脂）	5 mL
	20515ES25	MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF （MBP标签蛋白高度交联纯化树脂）	25 mL
	20516ES03	MBPSep Dextrin 6FF Chromatography Column, 1ML （MBP标签蛋白纯化预装柱，1ML）	1 mL
	20516ES08		5×1mL
	20517ES03	MBPSep Dextrin 6FF Chromatography Column, 5ML （MBP标签蛋白纯化预装柱，5ML）	5 mL
	20517ES25		5×5mL

来源与原文

来源： 翌圣生物

原文链接： https://www.yeasen.com/solutiondetail/2145

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