胎牛血清解冻后有絮状沉淀，怎么判断是正常析出还是变质？

先看沉淀性状：白色絮状、摇晃不散，在胎牛血清中常是纤维蛋白或脂蛋白析出，尤其在37℃快速解冻或反复冻融时更明显。你可以低速离心3000 g 10分钟，看沉淀是否松软、上清是否透明；如果上清清亮、沉淀量不多，多半是正常析出。之前批次少不代表异常，不同批血清析出倾向有差异。建议以后-20℃取出后放4℃缓慢解冻，解冻后轻柔混匀再分装，不要直接37℃水浴，这样会减少絮状沉淀。

SDS-PAGE可以做，但最好用同批正常血清和该问题批同时跑胶，看蛋白条带是否出现明显降解或缺少主带；絮状沉淀样本先离心，分别取上清和沉淀跑胶比对。如果条带无差异，沉淀很可能是纤维蛋白原类析出。考虑到一瓶500 mL三千多，建议你拍照、记录批号和沉淀情况，先和供应商书面沟通，保留未开封瓶；如果细胞功能验证或支原体检测出现异常，再走退货换货。一般正常析出通过离心或过滤后仍可使用，但若不放心，换货是合理要求。

絮状沉淀不能直接作为支原体污染依据，支原体通常肉眼不可见。你可以取1 mL血清送PCR支原体检测，同时把剩余血清用0.22 μm滤器过滤，分别用未过滤和过滤后的血清培养RAW264.7，观察细胞形态、增殖和贴壁；如果过滤后培养仍出现细胞状态差或污染迹象，则更需关注其他问题。过滤本身会丢失部分大分子，但不影响短期判断。若过滤后沉淀消失、细胞状态良好，说明沉淀更多是物理析出。

同问，我解冻后也有少量絮状，离心后能用吗？

放4℃过夜解冻会少很多，别用37℃快速摇。