小鼠血清测IL-6复孔CV超15%，需要做稀释线性吗？

CV 超 15% 更常见是加样和洗板不均。检查移液器校准、枪头一致性，血清样本先低速离心取上清，避免吸到纤维或脂质；复孔不要共用一个稀释管，两个独立稀释管分别加样。洗板时每孔加满洗液，拍干动作一致，避免孔间残留。孵育时贴封板膜，摇床速度均匀。标准曲线好说明试剂整体没大问题，重点练加样和洗板就能把复孔 CV 压下。

血清复孔 CV 高，做稀释线性很有必要。取 2-3 个代表性血清做 1:2、1:4、1:8 梯度，回算浓度应随稀释倍数成线性；若不成线性，说明基质干扰或低值稀释度落在标曲不稳区。同时做加标回收，低、高两个水平，判断准确性。标曲好只代表标准品稀释液体系没问题，血清基质不同，干扰更容易体现在样本稀释线性上。建议先把稀释线性跑出来再讨论手法。

开封后剩余板条马连同干燥剂放回铝箔袋，封口夹或封口机封紧，4°C 保存，别直接放冰箱不密封。一般建议 2-4 周内用完，时间越长越易吸潮。标准品和检测抗体按说明书分装冻存，避免反复冻融。若需较长期使用，最好和厂家确认开封稳定性，或后续每批实验用标准曲线桥接，防止旧板条性能下降影响结果。

小鼠血清里可能有补体、异嗜性抗体或类风湿因子，会造成单个样本复孔差异。可尝试厂家推荐的血清稀释液或加入阻断剂；仍然高就换用不同捕获/检测抗体对的高敏盒对比。不要只做 1:2，建议加做 1:4、1:8 两个稀释度，回算浓度若差异大，说明存在干扰或低于定量下限。稀释线性比单次复孔 CV 更能说明问题，也方便判断是否需要更换试剂盒。