LPS灌胃给小鼠会引起肠道炎症吗？必须用超纯的去内毒素水配吗？

灌胃前一般禁食4-6小时不禁水，减少胃内容物影响。灌胃体积小鼠常用10mL/kg，20g小鼠约0.2mL，不要超过0.3mL。LPS配成工作液后现配现用，用一次性无内毒素离心管。灌胃后1-3小时观察精神状态，肠道局部炎症指标可在6-24小时检测。注意灌胃本身会产生应激，设溶剂对照很关键。如果要做肠道屏障损伤，可以在灌胃LPS后加一次低剂量DSS或热应激，单次LPS往往变化不够明显。

LPS灌胃小鼠主要引起肠道局部炎症，全身反应确实比腹腔注射弱很多，因为消化道屏障会限制LPS入血。单用LPS灌胃一般不适合做全身脓毒症模型，但它可以激活肠道NF-κB、促进促炎因子表达，也可和DSS、热应激、酒精等联用加重肠损伤。剂量文献常用5-20mg/kg，但具体要看你观察的终点，如腹泻评分、组织病理、紧密连接蛋白。建议先做5、10、20mg/kg梯度，观察24小时内体重、粪便和肠道炎症指标。

配液不建议直接用普通超纯水。普通超纯水机即使出水电阻率高，储水罐和管路容易滋生革兰氏阴性菌，产生的内毒素靠高压灭菌除不掉，可能干扰结果。LPS灌胃实验本身就在加内毒素，如果对照组溶剂也含内毒素，就分不清是灌胃LPS的作用还是溶剂本底。建议用商品化无内毒素水，如LAL reagent water、WFI级，或确认超纯水系统定期消毒、换柱，并取水样做内毒素检测。无菌无内毒素PBS也可以。

实验设计至少设空白对照和LPS组。若担心普通超纯水内毒素，可先取水样用鲎试剂测一下，一般要求低于0.01EU/mL才适合当溶剂。商品化无内毒素水开封后避免长期放置，分装后一次性使用。若资金允许，所有灌胃器具用无热原的一次性耗材，玻璃器皿需250℃干烤去热原。结果判定时若对照组肠道炎症指标也升高，首先怀疑溶剂、灌胃操作或饲养环境内毒素本底。