这个凋亡试剂盒测鸡外周血淋巴细胞，FITC 通道能用吗？

50T 的具体价格和现货情况我不直接报，因为渠道、区域和促销差别大，群里说的数字容易误导。建议直接联系当地代理或厂家销售，问清 50T 货号、效期和是否有现货；常规货号如果代理备货，一般几天能到，没现货可能要调货 1-2 周。由于你这个是禽类样本，试剂盒说明书没有明确支持，最好先找技术支持确认是否可试用，或申请小规格/试用装，避免一次性买错。确认预实验能染上再考虑 100T 更划算。

Annexin V 不是抗体，它结合的是磷脂酰丝氨酸，这个在禽类细胞膜上也是保守的，理论上鸡外周血淋巴细胞可以用 FITC 通道检测。但试剂盒说明书只写哺乳动物，主要是因为厂家没有系统验证禽类样本，不代表一定染不上。建议先做一个小预实验：取鸡外周血淋巴细胞，分未染、FITC 单阳、PI 单阳和诱导凋亡组。阳性诱导可用紫外线或地塞米松处理几小时，看 FITC 通道是否有明确阳性群。如果能染上，再扩大样本。

分离后是否需要刺激，取决于你要看什么。如果只是测基础凋亡率，分离后短时间培养 1-2 小时恢复状态就可以染，不要额外刺激；如果要研究药物或免疫激活后的凋亡，可以设 ConA 或 PMA/离子霉素刺激组，但刺激强度和时间要先摸索。禽类淋巴细胞对刺激的反应与哺乳动物不完全一致，建议做时间梯度，比如 6、12、24 小时，再选合适点染 Annexin V/PI。不要刺激完马上染色，结果会既有活化又有凋亡，难以解读。

FITC 通道本身能不能用，主要看你的流式仪配置，488 nm 激光和 530/30 或类似滤光片都能测 FITC，鸡细胞不影响。需要注意鸡红细胞有核，外周血分离淋巴细胞时如果只裂红不彻底，有核红细胞会进入 FSC/SSC 淋巴细胞区域，造成背景干扰。建议用禽类专用密度梯度离心液或 ficoll 分离，取白膜层，必要时再裂红一次。分离后镜下确认纯度，淋巴细胞比例太低时 Annexin V 结果不好解释。