Question Detail
After collecting rat brain tissue from the animal room, should it be placed in liquid nitrogen first or soaked in Trizol first for preservation? Does this affect RNA integrity?
Reagent Selection
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How to Answer This Question
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1
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All Answers4
赵
赵阳超
2026-09-12
样品量大时建议统一流程，不要一部分Trizol一部分液氮，避免批间差异。做法是RNase-free冻存管事先编号，取材后快速分块，小块液氮速冻，当天来不及就全液氮，后续统一研磨。若条件有限，也可用RNAlater替代Trizol浸泡，4℃过夜后转-80℃，但脑组织渗透慢，需切成2-3mm小块。保存方式影响下游qPCR或转录组，值得花一次预实验确认。
M
MarkPCR4635
2026-09-22
液氮速冻后-80℃保存是脑组织RNA的常用方式，前提是取材快、切块小，避免反复冻融。提RNA时不要室温解冻，直接带液氮研磨或加Trizol低温匀浆。直接丢Trizol 4℃保存几天，短期可以抑制RNase，但脑组织整块浸泡时内部可能没充分接触Trizol，存在局部降解风险。脂肪含量高的脑组织长时间泡在Trizol里，后续分相也容易浑浊。
K
Kit4137
2026-09-15
两种方式差异可以用预实验评估。我们曾比较大鼠皮层，液氮组RIN多在8以上，Trizol 4℃浸泡24h组RIN多在7左右，28S/18S尚可，但泡到3天以上完整度会下降。建议取同一脑区，分液氮、Trizol 4℃、Trizol -20℃三组，提RNA后跑胶或测RIN。用数据决定正式样本，比只听经验更稳。
R
ResearchZone6756
2026-07-22
直接Trizol浸泡不是完全不行，但不建议作为几天的默认保存。若必须这样，把脑区切成≤2mm小块，使Trizol能渗透，并放-20℃保存，第二天或隔天尽快匀浆。4℃放几天通常不如-20℃。样品量大时，分批处理比整瓶泡着更可靠，因为瓶内温度不易均匀。提取前如果看到组织块完整，需补加Trizol重新匀浆。
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