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全部回答5
周
周刚超
2026-09-21
CHO无血清体系有的不含L-谷氨酰胺或需要另外加HT补充剂，换之前要看配方。如果是CD培养基，通常需添加厂家配套的补料，并注意渗透压和微量元素。我们遇到直接换后活率掉得厉害，最后发现是培养基缺谷氨酰胺，补加后恢复。换液频率在无血清阶段可维持2-3天，视密度和pH。
C
Cell
2026-09-18
如果细胞状态好、处于对数期，可以直接换，但要把接种密度提高到1.5-2×10^6/ml，换液时旧培养基离心后细胞用无血清重悬。直接切后前48小时会有部分死亡，活率可能掉到70%左右，只要不死太多，通常5-7天能适应。但商品化无血清最好提前37度预热，并补加谷氨酰胺或厂家推荐的添加剂。
W
Wendy3198
2026-08-26
我们CHO-K1是从10%FBS逐步切的：先降到5%FBS+5%无血清，传1-2代；再2.5%FBS+7.5%无血清，传1-2代；然后1%FBS+无血清，最后完全无血清。每步观察活率>85%再进入下一步。每2-3天按1:3-1:4传代，别等细胞太密。这样周期约10-14天，但比直接换稳。
何
何敏娜5841
2026-09-18
无论是逐步还是直接，都建议先留一批含血清的冻存种子或持续培养备份，别全部切过去。无血清适应后要连续监测活率、倍增时间和重组蛋白表达，至少稳定3代再做正式生产。也可以做小规模平行对照：含血清 vs 逐步 vs 直接，看表达量差异。我们最终逐步组的蛋白产量最高，直接组早期低20%左右。
潘
潘芳9832
2026-09-07
逐步降血清时不要频繁离心换液，可以采用半量换液或直接传代稀释，减少机械损伤。我们步骤：每代用无血清培养基稀释接种，不清洗细胞，让残留血清逐步稀释掉，例如1:4传代后血清浓度自动变为四分之一。这样比离心去血清温和，细胞不结团，适应更快。
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