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全部回答5
生
生工博士7190
2026-09-24
无血清替换后前1-2代生长会慢，不要急着转染。建议从复苏后至少稳定传3代再做瞬转，接种密度控制在0.5-1×10^6/ml，转染前一天换新鲜无血清培养基。我们遇到表达下降通常不是培养基本身，而是细胞没适应或补料时机不对。2-3升规模可以用三角摇瓶，记得校正摇床转速和CO2，避免蒸发体积变化影响结果。
L
Lab2605
2026-09-09
不要从10%FBS直接换成完全无血清，293虽然皮实，但直接换容易贴壁变差、结团，转染时活率掉。我们是用含5%FBS:无血清=1:1过渡1代，再换25%血清/无血清，最后全无血清，每步2天左右。如果时间紧，至少先用无血清培养基和含血清培养基1:1混养24小时再转无血清，活率低于85%不建议转染。
何
何鹏8927
2026-09-03
单升300以内可以重点看国产无血清瞬转培养基，部分配方对标进口，支持293F/293E悬浮。对比时别只看目录价，问清楚是否含谷氨酰胺、是否需要另外加抗结团剂、是否配补料价格。还要让对方提供293瞬转表达参考数据和试用装批次COA。我们选型时同时测了3家国产，表达量差异可到30%，所以必须拿到试用装做实转。
L
Lisa3556
2026-09-23
国产几家都有50-100ml试用装，有的可以申请免费或按运费寄，进口品牌部分代理也有试用政策。预算单升300以内选国产Fed-batch型或进口基础款一般够用，但瞬转表达阶段可能需要额外补料。到货看区域，国产常用型号现货一般3-5天，进口可能要1-2周，建议同时问1-2家代理留库存。
E
Elisa2013
2026-09-07
我们做过HEK293悬浮驯化后从含血清切到无血清，抗体表达没掉，反而批间差小很多。但无血清体系对PEI转染更敏感，质粒DNA与PEI比例要重筛，一般DNA:PEI从1:3附近试；培养基最好选支持瞬转的专用款，并按厂家建议加补料。2-3升规模可先做50-100ml摇瓶评估，别直接上大瓶。
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