悬浮Jurkat细胞电转还是化学转染试剂更合适？求用过的人说说

悬浮细胞批量96孔做GFP筛选，我更支持化学转染+降低每孔细胞量。很多失败是因为悬浮细胞沉底不匀，加样前混匀，加后用板式离心200g×2min，让复合物接触更充分。试剂可以考虑Thermo Lipofectamine 3000加P300助剂，或者Polyplus jetOPTIMUS，我对比过，后者对Jurkat毒性略低。96孔板每孔总DNA 0.1-0.2μg，转染后16-24h离心换液，能提高阳性率。发货周期：广州/珠三角现货一般1-3天，具体以代理库存为准。

Jurkat这类悬浮细胞，如果样品量不大但96孔板检测多，我更倾向电转，尤其Lonza 4D的96孔模块或BTX 96-well，批量加样一致性好。但要考虑仪器平台，如果实验室没仪器，一次性买buffer和耗材成本不低。化学转染试剂里可试 TransIT-X2或jetOPTIMUS，对悬浮细胞比普通Lipofectamine 3000稳定，操作上先以500g离心后重悬，加DNA-试剂复合物，96孔板每孔总量20-30μL，边加边晃。发货一般区域代理2-3天。

如果你们已经有电转仪，不要犹豫用电转；悬浮Jurkat化学法批次间容易受细胞状态影响。没有仪器的话，不必专门买，先找附近实验室试一下。化学转染操作简单可批量：96孔板提前用含血清培养基铺细胞，试剂和DNA用Opti-MEM混，室温10分钟，逐孔加。建议用TransIT-X2，1μg GFP质粒对应3μL试剂，按说明书做梯度，选24h GFP阳性率和细胞活性双高。价格和货期要问当地代理商，有的可以提供0.1 mL试用装。

Jurkat悬浮化学转染效率普遍不高，电转虽然伤细胞但转进去了才是关键，同蹲经验。

我们做过对比，电转效率高但活率低，化学试剂温和但效率看批次。