💡
如何回答这个问题
-
1
看清问题背景
先完整阅读问题描述、分类与标签，确认提问者的真实场景。
-
2
给出可操作的回答
写明具体步骤、注意事项和判断依据，避免只给结论。
-
3
补充参考来源
可以引用标准、文献或产品说明书，让回答更可信。
-
4
等待采纳与反馈
提问者采纳后会收到通知，也可以在评论区继续讨论。
全部回答5
B
BufferOne3914
2026-09-15
如果考虑沉淀法，找大体积尿液专用沉淀液，别用细胞上清的沉淀试剂直接套。50-80ml通常要4°C过夜，离心后沉淀可能呈胶状，先用少量PBS或厂家稀释液重悬，再过SEC或蛋白清洗缓冲液洗一次，能减少杂蛋白。电镜背景脏大多来自尿调蛋白和盐类，单纯沉淀很难避免，后续质谱前建议做SDS-PAGE看高丰度条带，必要时加一次SEC。
冯
冯检测4102
2026-09-02
50-80ml大鼠尿液我建议先低速离心去细胞和碎片，再用100kDa超滤管浓缩到5-10ml。超滤管选择低吸附再生纤维素膜，避免外泌体过度贴壁；浓缩后用SEC或膜亲和柱提取，比直接沉淀背景干净很多。单次成本把超滤管按可重复使用摊销，加上柱子耗材，100元内通常能谈下来。尿液稀，收样时加蛋白酶抑制剂，4°C尽快处理，避免Tamm-Horsfall蛋白聚集。
何
何燕
2026-09-19
大体积、低丰度样本，批次稳定比便宜更重要。联系国产厂家时直接说长期合作，要求提供三批试用的粒径和蛋白谱数据，并确认大体积尿液方案有现货、支持阶梯价和固定物流。质谱对去垢剂和盐敏感，一定问清洗涤液是否质谱兼容。可以先买试用装，用同一批大鼠尿液对比你现在的沉淀法，重点看质谱鉴定到的外泌体标志蛋白和杂蛋白下降程度。
质
质控老手7179
2026-09-17
我们直接用超速离心，体积大太累了，也想找能上100ml的沉淀法试剂。
E
ExtractZone
2026-09-11
试试切向流过滤，可以处理大体积，但回收率要自己摸。
我来回答登录后可提交
回答需要登录会员账号（浏览无需登录）。 立即登录