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全部回答5
质
质控老张
2026-09-20
进口柱法洗脱体积大的问题我遇到过，国产膜亲和柱在这块反而更灵活，很多可做到80ul洗脱。联系厂家要小样本血浆的提取数据，尤其看miRNA测序建库后的比对率和外源spike-in回收。建议拿你现有样本做3个重复：进口柱法、国产柱法、必要时国产磁珠法。预算内可谈试用装，到上海冷链1-2天。注意问试剂盒是否含DNase处理，否则gDNA干扰miRNA定量。
V
ViviScience3728
2026-09-15
200-300ul血浆做miRNA测序，我不太建议直接沉淀，背景和得率不稳。优先找小洗脱体积的膜亲和离心柱或磁珠法，要求洗脱体积控制在50-100ul，避免后续浓缩。采购前问厂家能否直接提外泌体RNA，或提外泌体后裂解再走微量RNA柱，一步法省样本。上海一般顺丰冷链1-2天，让供应商发次日达。预算50-100元/份有国产可选。
董
董娜鹏3053
2026-09-09
你这体积很紧张，前处理要省。血浆先4°C 3000g离心10分钟去掉血小板和细胞碎片，不要反复冻融；提取后用Bioanalyzer或毛细管电泳看小RNA，不要只盯RIN，血浆外泌体RNA有时RIN不高但小RNA峰可用。加一个已知miRNA spike-in再提取，能监控得率和抑制物。洗脱体积如果还是大，用真空离心浓缩时温度别超过30°C，避免RNA降解。
杨
杨杰琳5914
2026-09-23
200ul血浆提取后RNA可能不够建库，建议至少500ul，除非用专门微量试剂盒。
K
KitMax2973
2026-09-16
我用某进口血清外泌体kit，150ul也能提，但颗粒数少，qPCR勉强够。
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