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同一品牌不同批次胎牛血清内毒素含量波动会很大会影响293T转染吗?

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提问:韩敏敏 2026-08-05 浏览 278 3 个回答
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陈
陈辉 2026-07-23
293T 对 LPS 的敏感度确实比原代巨噬细胞低,但内毒素上升后可能出现细胞状态变差、贴壁不牢、转染后死亡率升高。你们这次报告只写 <10,不能排除实际已经到了 5 EU/mL 以上。建议做平行实验:同一批冻存 293T 分两组,一组用旧批次血清,一组用新批次,48 小时看形态和倍增,再跑一次荧光素酶或 GFP 转染。若新批次内毒素复测明显升高,先停用于关键转染;若内毒素不高但细胞仍飘,就要查批间其他差异,甚至找供应商换批。
检
检测小助手 2026-08-15
每周 200 mL 的用量,最怕的是换批后没有验证就直接上。以后可以按三步走:到货先取样,用鲎试剂定量内毒素;同时用 293T 做 48 小时生长曲线;再做一个转染效率对照。三项都通过再扩大使用。也可以根据用量一次锁定同批 6-10 瓶,减少换批频率。对于报告只写 <10 的批次,建议在采购时写明内毒素实测值需作为验收指标,不合格可退换。如果供应商连具体数值都不给,说明批次透明度不够,不太适合长期供应。
R
Rex 2026-07-08
不同批次血清内毒素有波动很常见,尤其供应商报告只写 <10 EU/mL 时,这个上限基本没有参考意义。你们之前实测多在 0.5 EU/mL 以下,新批次标 <10,不等于实际一定高,但需要立刻复测。可用鲎试剂定量法测同瓶留样,看具体数值。如果复测在 1 EU/mL 左右,对 293T 通常影响有限;如果超过 3-5 EU/mL,就要重视。另外批间差异不单内毒素,也可能来自激素、生长因子、pH 和渗透压,别只盯一个指标。
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