1g G418粉末怎么配100mg/mL母液和分装保存？

配好的100 mg/mL母液建议用无菌PBS或超纯水充分溶解，0.22 µm过滤，分装到无菌小管，-20℃避光保存。一般6~12个月内活性下降可接受，但反复冻融会加速失效，所以建议按1~2周用量分装，比如0.2~1 mL/管。日常工作液放4℃不要超过1~2周，出现颜色明显变深、沉淀或细胞杀伤曲线漂移就丢掉。配药时避免用含血清培养基直接稀释母液，长期强碱性或反复光照也会影响活性。

价格不要只看1g报价，要把效价、运输温度、分装规格、COA完整性放一起比较。进口原装1g可能货期较长，尤其遇海关查验；国内正规分装或国产批号通常到货快，但批次效价常波动。若实验室用量不大，建议先买1g分装试用，验收时做效价滴定和细胞毒性曲线；若大量筛选，进口大包装折算到有效成分可能更合适。采购前确认是否需冷链、是否有效价检测报告，以及销售人员能否提供同批次的筛选参考。

G418是硫酸盐，不同品牌标称效价常按有效成分活性单位标注。严谨做法是按COA上的效价换算：有效质量=总粉末质量×效价/100。例如标称700 µg/mg，即1g粉末里有效G418约700 mg。如果你想配100 mg/mL有效母液，需要约1.43g粉末定容到10mL；如果按总粉末质量直接1g/10mL，得到的是100 mg/mL总粉末浓度，实际有效约70 mg/mL。很多文献的筛选浓度没有严格区分，建议固定品牌批号后做杀伤曲线，不要把不同批次直接混用。

HEK293和HeLa没有绝对统一的G418浓度，只能给经验范围：HEK293常用维持浓度约400~800 µg/mL（按总粉末/厂家标定），HeLa常从200~600 µg/mL开始做致死曲线。关键是拿到新批号后铺不同浓度梯度（如0、200、400、600、800、1000 µg/mL），7~14天观察完全杀死未转染细胞的浓度。筛选时不要只用最低致死浓度，稳定株维持可降到筛选浓度的50%~70%。转染后应先让细胞恢复24~48h再加药，避免转染损伤被误判。