YSFluor® 594 EdU Fluorescence Imaging & Flow Cytometry Assay kit YSFluor® 594 Click-iT EdU通用款细胞增殖检测试剂盒(红色荧光)
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Q:该产品可以做体外吗?客户样本是组织。细胞样本可以吗?
A: 体外是可以,但是组织不可以,必须要保证能增殖,有DNA 合成,能进行增殖的细胞就可以。
Q: EdU 和Brdu 检测区别?
A: BrdU 免疫检测需要变性DNA 后才能与抗体结合,而 EdU 因为其特有的炔羟基团可以与一些荧光染料发生“Click”化学反应,无需变形,从而将细胞标记上荧光,因此应用更广泛。
Q:能否在活细胞中进行 Click-iT EdU 检测?
A: 不可以。虽然 EdU 是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click 反应必须在固定和通透的样品上进行。
Q: 观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
A: 叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click 反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无 EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。
Q: 为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号?
A:

已发表文献
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