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Q:用脱硫生物素洗脱,除了用HABA再生以外,还可以用氢氧化钠再生吗?可以重复使用几次?
A:使用脱硫生物素作为洗脱液,用1 mM HABA或低浓度氢氧化钠(0.1 M)可再生10次左右。
Q:这个产品可以用D-生物素洗脱吗?
A: 可以用,但是用D-生物素洗脱后必须用高浓度氢氧化钠再生,重复使用时载量会明显变低。所以如果填料需要重复使用就必须用脱硫生物素洗脱。
Q:这个产品属于第几代?
A: 我们此款产品属于第二代。第三代填料的洗脱液可用D-生物素,能在低浓度生物素或者变性等特殊条件下结合Strep标签蛋白,再生方法可用氢氧化钠再生且重复使用效果较好。第三代产品是Strep(Ⅱ)标签蛋白琼脂糖纯化树脂(耐生物素版)(Cat#20795ES) 。
Q:这个产品耐压多少?
A: 填料耐压0.3 MPa。
Q:如果我的Strep-Tag II 标签是位于我融合蛋白的中间位置可以用这个树脂吗?
A: 取决于标签的暴露情况
Q:如果用蛋白洗脱不下来,那怎么办?
A: 在洗脱液中加终浓度0.1%-0.5%Triton X-100,室温混合孵育30min。
Q:一个 beads上大概有多少个strep-tag II 的结合位点?我想知道这一个beads上能负载多少个蛋白?
A: 1 mL微球上的strep-tag II结合位点约为1.8×10^17个,1 mL填料中的微球颗粒数约为1×10^6。
Q:用HABA再生后填料变色并洗不白,如下图。

A: 这个是HABA和配体结合,可以平衡后直接上样,strep标签蛋白会将HABA竞争下来
Q:填料配基的分子量是多大?
A: 15 kDa
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