谷胱甘肽高速纯化树脂 GST标签纯化树脂

Q：该产品使用之前为什么需要颠倒若干次？

A：本品谷胱甘肽纯化树脂由琼脂糖微球构成，若干次颠倒可使琼脂糖珠混合均匀。

Q：样品可以在室温下操作吗？

A：尽量避免，最好在 4℃或者冰上操作。

Q：为什么洗脱组分中无目的蛋白？

A：可能是柱子平衡时间太短，目的蛋白不是在 pH 6.5-pH 8.0 范围内结合，建议用pH 6.5-pH 8.0 的buffer 进行充分的平衡，如 PBS。

Q：为什么电泳或 Western Blot 检测中发现多条带？

A：可能是细胞破碎过度，建议减少细胞破碎时间，超声前加入溶菌酶（菌液体积的0.1 倍 10 mg/mL 溶菌酶，25 mM Tris-HCl，pH 8.0），避免发泡导致蛋白酶变性，过度超声破碎增加宿主内源蛋白与 GST 融合目的蛋白的共纯化。

Q：洗脱液怎么配？

A：按说明书用平衡缓冲液配制还原性谷胱甘肽（Cat#60342ES）即可，配完后需要检测PH是否跟平衡缓冲液一致，一般谷胱甘肽溶解后pH会偏酸，需重新调整到pH 7.4或pH 8.0（建议调整到pH 8.0，适当提高pH能提高洗脱效率）。