Bovine Thrombin, High Specific Activity, >2000 IU/mg 牛凝血酶(高活力,>2000 IU/mg)
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Q:该产品的最适反应温度是多少?
A:具体反应温度可根据融合蛋白的性质而定。
Q:凝血酶常用于哪些实验?
A:常用于诊断学中凝血化验、凝血因子检测、血液或血浆的脱纤维化等;也常作为工具酶,用于重组融合蛋白(包含凝血酶识别位点)的特异性断裂。
Q:该产品有何特点?
A:本品是从牛的血浆纯化制得,具有纯度高、比活高、不含有其他蛋白酶活性、灭活病毒、生产稳定性好等特点。
Q:我们凝血酶的酶活指的是每mg干粉的活性吗?
A:我们的凝血酶没有每毫克干粉的活性指标,说明书的的比活度指的是产品中每毫克蛋白质含有的凝血酶活性。
Q:该产品需要用什么溶解? 消化缓冲液加多少?
A:建议凝血酶母液用生理盐水配制,切割时的缓冲液最好加入0.9%的氯化钠,可以在4℃切割24小时。建议加入等量的消化缓冲液(推荐20mM Tris-HCl缓冲液,含150mM 氯化钠,pH8.0)
Q:牛凝血酶按照体系切不掉,蛋白还是挂柱的?
A:如果在4℃切割不明显,可以尝试在37℃进行切割实验,每2小时补加适量的凝血酶,看看是否能有效切割。
Q:你们有验证过的数据吗,这个酶在不同温度的切割效果?
A:用我们实验室的融合蛋白,每1mg融合蛋白加凝血酶5U,反应缓冲体系为20mM Tris-HCl 含0.15M 氯化钠,pH7.8,比较37℃和4℃的切割效果,反应时间4小时,两种温度条件下均可实现基本完全切割,在1小时和2小时,37℃切割效果明显较4℃好。4小时后两者差别不明显。
Q:牛凝血酶1kU是相当于多少g?干粉是多少g?
A:我们的凝血酶每1 KU中约含有凝血酶蛋白质0.5 mg,凝血酶1KU每支中干粉质量约30 mg,大部分为辅料。
Q:这个牛凝血酶配成母液后在什么条件下储存比较好,可以储存多久?
A:一般建议一次用完。凝血酶产品为冻干粉末,溶解时,建议每支凝血酶加0.9%氯化钠溶液1~2 ml复溶,制成浓溶液,该浓溶液在-20℃以下保存,6个月内活性变化不显著,但应避免反复冻融。临用前,再用工作液稀释至终浓度。
一般应避免使用纯水溶解和稀释,在纯水中凝血酶容易发生变性失活。
Q:牛凝血酶酶切体系是否可以用磷酸盐缓冲代替呢?
A:一般磷酸盐缓冲液和柠檬酸盐缓冲液都是可以的。
Q:产品在常温下放了几天,有影响吗?
A:产品在常温下放置一周以内影响不大。
Q:凝血酶怎么去除?
A:凝血酶可从切割产物中用苯甲脒或肝素琼脂糖亲和纯化移去。
Q:牛凝血酶的等电点是多少?
A:据文献报道牛凝血酶的 PI是7.05。
已发表文献
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