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Q:提取外泌体DNA时,需要在什么温度下离心?
A:所有离心步骤须在室温下操作,在4℃时离心会降低DNA的产量。
Q:为什么提取的外泌体DNA A260/280比值低于2.0 ?
A:大部分外泌体DNA是片段化基因组DNA,长度大约100-300bp,且浓度很低,DNA的A260/280比值会随DNA浓度降低而降低,正常A260/280比值在1-1.6 之间,低的A260/280比值不会影响下游应用。
Q:提取的外泌体DNA下游应用时,如PCR不是很好?
A:洗脱的外泌体DNA中含有乙醇和/或有较多盐离子污染,会抑制PCR反应。因此在最后洗涤时,将吸附柱置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的洗涤液。
Q:请问操作步骤中的200μL 外泌体有参考的浓度或者颗粒数吗?
A:如果是提取细胞上清,一般情况是20ml来源的;如果是血液的,500ul血液来源的外泌体就足够了,参考的浓度或者颗粒数在11-12次方/mL。
Q:请问试剂盒中DNA载量是多少,柱子最高可以过几次?
A:该产品配套的纯化柱载量为50ug;柱子最高过3次。
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Exosome Purification Column 外泌体纯化柱
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