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Q: 41216ES和41206ES有什么区别?
A: 41216ES是升级款。升级款多加了除杂蛋白的试剂solution B,除杂蛋白的效果明显。结果上来说,同样的样品41216ES提取的蛋白浓度会低一些,但是纯度会高一些。两款试剂盒都是共沉淀法,做蛋白质组学推荐41216ES新款试剂盒。新款试剂盒对杂蛋白的效果更好,对下游实验的影响也小。
Q: 外泌体提取时,为什么需要二次重复离心,彻底去除上清?
A:血清或血浆中含有大量蛋白质,彻底去除以防止对提取的外泌体造成更多 蛋白质污染。
Q:提取的外泌体如何保存?
A:短时间内使用,可在 2-8℃保存一周,若长时间保存,建议放在-80℃冰箱 中,避免反复冻融,另外,最好是使用低吸附蛋白的保存管。
Q:重悬的外泌体颗粒不能通过或部分通过纯化柱,如何处理?
A:由血清或血浆等样品提取的外泌体含有较多的污染蛋白质,离心经过纯化 柱时可能会堵塞过滤膜,所以,重悬时需要多次吹打,彻底溶解沉淀,然后在经过纯化柱纯化。
Q:如何鉴定提取的外泌体?
A:外泌体是体细胞分泌的细胞外囊泡群体中一种,直径一般为 30-150nm,通 常确定外泌体一般需要三个条件:电镜形态观察,颗粒粒径测定和蛋白标志物检测(Western Blot 检测 CD9,CD81,CD63,Alix,TSG101 等)。
Q:本试剂盒提取外泌体方法与超速离心方法相比有哪些优势?
A:主要表现在:操作简单,不需要额外仪器设备,节省时间,可小体积样本提取等。
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