Trypsin (0.25%), phenol red 胰酶溶液(0.25%),含酚红
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Q:胰酶是什么?
A:胰酶是一种解离试剂,本质是降解蛋白的酶,生物学实验中用来将贴壁细胞从贴壁表面解离下来和细胞解聚,也可以用于原代细胞的传代过程中组织的分散。
Q:为什么收到的胰酶颜色有差异?
A:胰酶溶液需要用干冰运输,运输过程中,胰酶溶液中二氧化碳与干冰挥发的二氧化碳可能会极少部分的气体交换,导致溶液 pH 的漂移。胰酶里的酚红作为 pH 指示剂,因此运输过程中导致pH 值的变化,pH 值从 7.2-8.0 变化到 6.8 左右,pH 值从 7.2-8.0 溶液为淡红色,pH 值 6.8 左右溶液是淡黄色, 因此胰酶颜色的变化是有 pH 改变引起,这种颜色变化是普遍现象,在不同供应商的胰酶产品都会出现。
Q:淡黄色的胰酶溶液可以使用吗?
A:能,对于胰酶呈现黄色问题,不同品牌也都对此现象进行了测试试验,变色的胰酶同样能很好的用于细胞的解离,可以放心使用。
Q:胰酶的保存?
A:胰酶可在-20℃保存一年,随着时间延长,胰酶的消化能力将减弱。胰酶可以分装后冻存,在使用前从-20℃冰箱取出,尽量避免在 4℃长期保存。
Q:胰酶消化时,胰酶不去除对细胞有影响吗?
A:细胞消化时,如果消化液中只有胰酶,不含 EDTA,不去除是没有问题的。如果消化液中含有胰酶和 EDTA,最好去除,EDTA 是一种化学螯合剂,能够螯合钙、镁离子,使细胞分离。但 EDTA 不能被血清中和,消化后要彻底清洗去除。
已发表文献
[1] Liu S, Xu DS, Ma JL, Huang P, Wu D, Ren LQ. LncRNA H19 Mitigates Oxidized Low-Density Lipoprotein Induced Pyroptosis via Caspase-1 in Raw 264.7 Cells. Inflammation. 2021;44(6):2407-2418. doi:10.1007/s10753-021-01511-1(IF:4.092)
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