MolPure® Endo-free Plasmid Mini Kit 无内毒素质粒小量提取试剂盒
勾选需要的规格可一次提交；也可以逐个询价。货号会一并带入询价单。
Q：加入去内毒素试剂后，溶液没有变得浑浊？
A：可能是本身内毒素低，也可能是加入 ER 溶液后，因为体系的 PH 差异、抑制物等，使得内毒素的凝集状态反应不一样。
Q：无内毒素质粒小提检测浓度很高？
A：客户的菌液量用了 20ml，太多了，导致 RNase 作用不足。
Q: 质粒浓度低
A: （1）拷贝数低或者大于10kb的质粒应加大菌体使用量，并按比例增加后续buffer的用量；（2）细菌可能没有充分裂解。
Q: 裂解液有沉淀
A: 裂解液中含有NaOH，可能盐离子析出，可 37℃温浴复溶至溶液澄清再使用。
Q：质粒跑胶出现小于100bp小条带
A：可能RNA未去除干净（样本太多或者添加了RNase的缓冲液 RS酶活下降）或者裂解时间太长导致质粒受到破坏。
Q: 内毒素清除离心后分层不彻底
A: 提升离心温度；加大离心转速；增加离心时间。
Q: 提取的产量低
A: 中低拷贝质粒：长片段、表达型载体常以低拷贝为主，建议加大菌体使用量，菌液过夜培养；
菌种问题：菌种保存中质粒丢失，养菌前先划线活化，稳定产量；
菌体未充分裂解：在buffer种充分重悬，避免成团；
试剂准备有误：有沉淀析出的溶液需要加热；加入的乙醇体积不准；
洗脱不充分：洗脱液预热，二次洗脱。
Q: 有基因组污染
A: 培养时间太长：培养时间建议控制在12-16h；裂解不充分。
Q: 下游结果不理想
A: 盐离子污染；乙醇污染；质粒降解；层析柱膜脱落。
已发表文献
[1] Han P, Cao P, Yue J, et al. Knockdown of hnRNPA1 Promotes NSCLC Metastasis and EMT by Regulating Alternative Splicing of LAS1L exon 9. Front Oncol. 2022;12:837248. Published 2022 Jun 23. doi:10.3389/fonc.2022.837248(IF:5.738)
[2] Zhang J, Wang W, Feng N, Jiang X, Zhu S, Chen YQ. Ndufa6 regulates adipogenic differentiation via Scd1. Adipocyte. 2021;10(1):646-657. doi:10.1080/21623945.2021.2007590(IF:4.534)
[3] Zhu S, Zhang J, Wang W, Jiang X, Chen YQ. Blockage of NDUFB9-SCD1 pathway inhibits adipogenesis : Blockage of NDUFB9-SCD1 pathway inhibits adipogenesis. J Physiol Biochem. 2022;78(2):377-388. doi:10.1007/s13105-022-00876-7(IF:4.158)
内毒素去除原理、方法、步骤
技术讲解
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