TOP10 Chemically Competent Cell Top10化学感受态细胞

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分子克隆基因组文库构建

Product no.11801ES Sizes1 options Documents1 files SourceYeasen · Official

Cat. No. 11801ES80 现货

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Overview

Specifications

Brand翌圣生物 Yeasen

Cat.No11801ES

Specification适用广泛：可用于克隆哺乳动物基因组 (甲基化) 和植物 DNA、文库构建或任何常规分子克隆应用

Origin翌圣生物科技(上海)股份有限公司

应用方法 分子克隆用于DNA克隆和质粒扩增 基因组文库构建构建哺乳动物基因组和植物DNA文库

适用物种种属 大肠杆菌

生物特性参数 试剂类型化学感受态细胞 应用分子克隆 菌株TOP10 基因型F-mcrA △(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ△M15 △lacX74 recA1 ara△139 △(ara-leu)7697 galU galK rpsL (StrR) endA1 nupG 抗性链霉素(StrR)

技术参数 储存条件-80℃保存，有效期6个月 运输条件干冰运输 转化效率10^8 cfu/μg DNA以上

实验类型 化学转化将外源DNA导入感受态细胞 蓝白斑筛选用于重组克隆的筛选

FAQ

Q：pUC19 (control vector, 10 pg/μL)是什么抗性？

A：氨苄抗性的。

Q：11801 和 11802 有什么区别？

A：11802 稳定一些，比较常用。

Q：最大可以转化多大的质粒？约 20kb 可以吗？

A：转化质粒的大小与菌株有关， DH5α和 Top10 感受态细胞适合小于 15kb 的质粒。

Q：菌体大片长，无单个菌落，是什么原因？

A：先用感受态细胞转到含抗生素的培养基中，如果不长，说明抗生素没有失效。在排除抗生素是否失效的原因后，检查转化步骤，在转化操作时，请勿将菌体全部涂布于平板上。因为大量菌体的存在抑制正常转化子的生长。改正的方法有两种：一是省去 37℃ 复苏培养的步骤，这样不但节省了时间，而且也不出现云雾了；二是 37℃复苏后只吸取 50-100 µL 菌液涂布即可。

Q：涂布 Amp＋板后，总是有很多卫星菌落，单菌落长不大。

A：Amp 抗性板铺板密度过高或培养时间过长都会导致出现对 Amp 敏感的卫星菌落，因此涂布 Amp 抗性板时菌密度应适当降低，同时 37℃培养时间不超过 20 h。另外推荐选择培养基中使用羧苄青霉素代替氨苄青霉素(Amp)，并将抗生素浓度提高到 100µg/mL，可使情况改善。