Hieff Clone® Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted 零背景TOPO-TA克隆试剂盒（不含MCS多克隆酶切位点）
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Q：TOPO 克隆和一步法克隆应用方面的区别？
A：TOPO 克隆主要用于构建克隆载体，应用于目的基因的复制，保存或测序等；一步法克隆可用于构建克隆或表达载体，点突变，多片段克隆等。
Q：TOPO 载体含有启动子吗？TOPO 载体是什么抗性？
A：没有启动子，因为TOPO 载体是克隆载体。氨苄抗性。
Q：载体能否提供全序列？客户实验能否用客户自己的载体？
A：a）可以提供全序列。
b）不能用客户的载体，试剂盒中已带有偶联TOPO 异构酶的载体。
Q：PCR 产物是否需要特殊处理？
A：无需特殊处理，但为了保证阳性率，最好进行胶回收纯化。
Q：平末端和 TA 克隆试剂盒的 Enhancer 能混合使用吗？
A：不建议混合使用。
Q：反应过夜可以吗？
A：不可以，TOPO 异构酶具有限制性内切酶活性，时间过长会重新切割重组质粒，建议反应时间不超过 5min。
Q：TOPO 载体最大可插入多大片段？能否插入多个片段？
A：a）验证过 5kb，一般片段越大，难度系数也会更高些。b）不能插入多片段，只能单个片段的插入。
已发表文献
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